HIV-1P24蛋白的原核表达及单克隆抗体的制备  

作　　者：汪龚泽[1] 刘朝奇[1] 杨建林[1] 覃晓琳[1] 吕佰瑞[1] 姚佳红[1] 

机构地区：[1]三峡大学分子生物学研究所,湖北宜昌443002

出　　处：《重庆医学》2012年第7期696-698,共3页Chongqing medicine

摘　　要：目的制备HIV-1P24蛋白及单克隆抗体,建立酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测HIV感染。方法聚合酶链反应(PCR)扩增p24基因,并将其克隆到原核表达载体pET-28a(+)中,经E.coli表达并纯化HIV-1P24蛋白。以纯化P24蛋白抗原免疫Balb/c小鼠,取其脾淋巴细胞与小鼠骨髓瘤SP2/0细胞融合,制备能产生P24单克隆抗体的杂交瘤细胞株,采用Wes ternblot、ELISA技术对制备的单克隆抗体进行初步鉴定,建立检测P24蛋白含量的ELISA竞争法。结果原核表达重组质粒在E.coli中能高效表达P24蛋白,从杂交瘤细胞中选取能稳定分泌P24单克隆抗体的杂交瘤细胞株,用ELISA竞争法检测HIV-1阳性的血清中P24蛋白含量与病毒载量显著相关。结论 P24蛋白及特异性单克隆抗体成功制备,并建立了检测P24蛋白含量的ELISA竞争法。

关 键 词：免疫缺陷病毒 质粒 抗体 单克隆 酶联免疫吸附测定 

分 类 号：R392.1[医药卫生—免疫学]