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机构地区:[1]包头医学院药学院,内蒙古包头014060 [2]中国医学科学院医药生物技术研究所免疫生物学室
出 处:《包头医学院学报》2012年第1期9-12,共4页Journal of Baotou Medical College
基 金:国家"重大新药创制"科技重大专项(2009ZX09303-005)
摘 要:目的:以ESX-1分泌系统为靶点,建立能够寻找既能抑制该系统发挥功能、降低结核菌毒力和细胞内生存力,又不抑制分枝杆菌生长、减少耐药性产生可能性的抗结核药物。方法:通过PCR的方法扩增得到Luciferase(LUC)、CFP-10及其突变体ΔCFP-10,应用搭桥的方法将二者融合,电击转化入海分枝杆菌,测定海分枝杆菌上清中LUC活性。结果:表达LUC-CFP-10的融合蛋白重组海分枝杆菌上清中荧光素酶的活性是表达末端缺失7个氨基酸的LUC-ΔCFP-10融合蛋白的10倍左右。结论:可以通过检测LUC-CFP-10蛋白的分泌,即通过测定海分枝杆菌上清中荧光素酶活性来反映ESX-1分泌系统的活性,而该分析方法可以发展成为寻找ESX-1抑制剂的高通量筛选方法。
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