禽流感病毒H5N1病毒颗粒中鸡胚宿主蛋白的质谱分析  

Identification of Host Proteins Packaged in H5N1 Avian Influenza Virus Particles by Mass Spectrometry

作　　者：王志武[1,2] 孙万春[1] 周悦[3] 丛中一[3] 周庆伟[3] 刘宁[4] 

机构地区：[1]吉林大学人畜共患病教育部重点实验室,长春130062 [2]吉林大学公共卫生学院,长春130021 [3]吉林大学药学院,长春130021 [4]吉林大学第二医院中心实验室,长春130041

出　　处：《分析化学》2012年第3期376-380,共5页Chinese Journal of Analytical Chemistry

基　　金：国家自然科学基金(No.21175055);吉林省科技厅(Nos.20090952;20110739;20110731);吉林大学基本科研业务费(Nos.450060445316;450060326056)资助

摘　　要：在A型流感病毒等许多包膜病毒的病毒颗粒中,除包含病毒基因组编码的结构蛋白外,还包含来源于宿主细胞的多种蛋白。然而,在鸡胚内增殖的病毒颗粒所包含的宿主蛋白的种类尚不清楚。本研究采用20%～60%(w/w)蔗糖密度梯度离心法分离纯化了繁殖于鸡胚的流感病毒,并用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(Sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)结合质谱法对纯化的流感病毒颗粒进行了全面的蛋白质组学分析。结果表明,在病毒颗粒中,除包含9种病毒编码蛋白外,还发现了12种来源于鸡胚的蛋白,如膜联蛋白A2、肽酰脯氨酰顺反异构酶B、过氧化物酶1、磷酸甘油酸激酶、丙酮酸激酶肌组织异构酶等,以及2种细胞骨架蛋白(微管蛋白b-3和肌动蛋白)。In this study,sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis（SDS PAGE） coupled with mass spectrometry were used to perform a comprehensive proteomics analysis of the purified influenza virus particles propagated from embryonated chicken eggs,which were purified by 20%-60% sucrose（w/w） density gradient centrifugation.In addition to the virus-encoded proteins,12 proteins originated from embryonated chicken eggs were identified in the purified virus particles,such as Annexin A2,Peptidyl-prolyl cis-trans isomerase B,Peroxiredoxin-1,Phosphoglycerate kinase,and Pyruvate kinase muscle isoenzyme.Two kinds of cytoskeletal proteins,tubulin b-3 and actin,were also detected.

关 键 词：鸡胚 流感病毒 凝胶电泳 质谱分析 

分 类 号：S852.65[农业科学—基础兽医学]