黄芪单体毛蕊异黄酮对TNF-α损伤人脐静脉内皮细胞ET-1／NO的影响  

The effect of astragalus calycosin monomer to TNF - α induced human umbilical vein endothelial cells ET- 1/NO

作　　者：宁雅娴[1] 王俭勤[1] 王雪婷[1] 王雅[1] 舒红[1] 唐柏山[1] 

机构地区：[1]兰州大学第二医院肾内科,甘肃730030

出　　处：《国际泌尿系统杂志》2012年第2期172-176,共5页International Journal of Urology and Nephrology

摘　　要：目的探讨黄芪单体毛蕊异黄酮对TNF—α诱导的人脐静脉内皮细胞（ECV-304）的一氧化氮（NO）、内皮素-1（ET-1）的影响。方法用DMEM培养液在37℃、5％CO2条件下对ECV304细胞株进行扩增至足够数量后，调细胞密度为1×10^5，并分为7组：A组：空白组，不加任何诱导剂；B组：TNF—α（40ng／ml）诱导组；C组：TNF—α（40ng／m1）＋氯沙坦钾（105mol／1）；D组：TNF—α（40ng／m1）＋毛蕊异黄酮（0．1mg／ml）；E组：TNF—α（40ng／ml）＋毛蕊异黄酮（1mg／ml）；F组：TNF—α（40ng／ml）＋毛蕊异黄酮（10mg／ml）；G组：TNF—α（40ng／ml）＋毛蕊异黄酮（20mg／ml）。分别于孵育6小时、24小时后时收集上清液，用ELISA检测上清液中一氧化氮（NO）、内皮素1（ET-1）的含量。结果①与空白组比较，TNF—α降低了ECV-304NO水平（P〈0．001）、提高了ET—1水平（P〈0．001）；②氯沙坦钾提高了ECV-304NO水平（P〈0．001）、降低了ET—1水平（P〈0．001）；③毛蕊异黄酮（0．1mg/ml～10mg／ml）能够促进ECV-304细胞NO的产生（P〈0．001）、降低ET—1的产生（P〈0．001）；④氯沙坦钾和毛蕊异黄酮（20mg／ml）对ECV-304细胞ET-1和NO水平的影响无明显差异（（P〉0．05）；⑤毛蕊异黄酮浓度（在0．1mg／ml-20mg／ml内）与ECV-304ET—1的分泌呈负相关性（r=-0．02、P〈0．001）；与ECV-304NO的分泌呈正相关性（r=0．0075、P〈0．001）。结论黄芪毛蕊异黄酮单体可以促进TNF—α诱导的内皮细胞NO分泌，抑制ET—1分泌，并在一定浓度内（0．1mg／ml-20mg／ml）呈浓度依赖性。Abstract Objectives To investigate the astragalus calycosin monomer TNF - α induced human umbilical vein endothelial cells （ ECV - 304） of nitric oxide （ NO）, endothelin - 1 （ ET - 1 ） effects. Methods DMEM culture medium at 37 ℃, 5% CO2 conditions on the ECV304 cell line was amplified to a sufficient number, the adjnsted cell density of 1 × 105, and divided into 7 groups： A group： control group, without any inducer; B group： TNF-α （40ng/ml） induced group; C group： TNF-α （40ng/ml） ＋ losattan （10 -5mol/l） ; D group： TNF-α （40rig / ml） ＋ calycosin （0. lmg/ml） ; E group： TNF -α （40ng/ml） ＋ calycesin （lmg/ml） ; F group： TNF - α （40ng/ml） ＋ calycesin （10mg/ml） ; G group： TNF -α （40ng/ml） ＋ ealycasin （20mg/ml）. Were incubated for 6 hours, supernatant was collected after 24 hours, the supernatant by ELISA detection of nitric oxide （NO）, endothelin 1 （ ET - 1 ） levels. Results （1） compared with the eoutrol group, TNF -αreduced the ECV - 304 NO levels （ P 〈0.001）, increased ET-1 levels（ P 〈0.001） ; （2） losartan increased ECV -304 NO levels（ P 〈0. 001）, reduced the ET-1 levels（ P 〈0.001） ; （3） calycesin （0. 1 mg/ml - 10mg/ml） ECV -304 cells can promote NO production（ P 〈0.001 ）, reduced ET-I production（ P 〈0.001 ） ; （4） losartan potassium and calycesin （20mg/ml） ECV -304 ceils for ET- 1 and NO levels not significantly different（ P 〉0.05） ; （5） calyeesin eoncentratiou （ at 0.1 rag / ml -20mg/ml inside） and ECV -304 ET - 1 secretion was negatively correlated （ r = - O. 02, P 〈0.001） ; and ECV -304 NO secretion was positively correlated （r = 0.0075, P 〈0.001）. Conclusions Astragalus calycosin monomer can promote TNF - α induced endothelial cell NO secretion, inhibition of ET- 1 secretion, and within a certain concentration （0.1 mg/ ml - 20mg/ml） in a concentration dependent mannet.

关 键 词：肿瘤坏死因子 脐静脉 异黄酮 

分 类 号：R285[医药卫生—中药学]