一种快速显色定量检测微生物样品中棒酸的方法  

作　　者：戴西达[1] 向四海[2] 李佳[2] 高强[1] 杨克迁[2] 

机构地区：[1]天津科技大学生物工程学院,工业发酵微生物教育部重点实验室,天津300457 [2]中国科学院微生物研究所,北京100101

出　　处：《中国科学：生命科学》2012年第3期246-251,共6页Scientia Sinica(Vitae)

基　　金：国家自然科学基金青年基金(批准号:31000025)资助项目

摘　　要：为满足从棒状链霉菌突变库中筛选棒酸高产株的需求,基于显色法原理设计了一种快速检测棒酸含量的方法.该方法的反应机制是β-内酰胺酶水解其黄色底物头孢硝噻吩(λmax=390nm),从而生成红色产物(λmax=486nm).由于棒酸是β-内酰胺酶不可逆抑制剂,在上述反应中棒酸含量的高低将影响底物和产物的量,因此可以通过测定底物和产物的比值(A390/A486)最终测定棒酸的含量.本实验证实,该方法对棒酸的灵敏度为50μg/L,最佳检测窗口为0.05～10mg/L,且该方法的检测结果与HPLC法相关性很好.通过筛选一个小规模棒状链霉菌突变株库,证实该显色法可以快速识别和评价棒酸高产突变株.因此该方法若用于工业实践中的大规模突变株筛选,将节省大量的时间与人力.另外,还利用该显色反应开发了平板检测法,直接根据颜色差异定性判断平板菌落棒酸产量高低.该显色法是一种快速、方便、可靠的棒酸产量检测方法,适用于高通量筛选棒酸高产株.

关 键 词：棒酸 棒状链霉菌 头孢硝噻吩 显色法 Β-内酰胺酶 

分 类 号：Q93[生物学—微生物学]