流式细胞术检测虾类血细胞活性氧含量方法的建立  

Measurement of reactive oxygen species (ROS) production in shrimp haemocyte by flow cytometry

作　　者：冼健安[1] 苟妮娜[1] 陈晓丹[1] 苗玉涛[1] 王安利[1] 

机构地区：[1]华南师范大学生命科学学院 广东省水产健康安全养殖重点实验室 广东省高等学校生态与环境科学重点实验室,广东广州510631

出　　处：《海洋科学》2012年第2期29-33,共5页Marine Sciences

基　　金：国家自然科学基金资助项目(30671628);广东省教育部产学研结合资助项目(2006D90204005);国家科技支撑计划项目(2007BAD29B06);广东省科技计划项目(2007B020708013);广东省重点科技项目(2009A020101006);广州市科技支撑计划项目(2009Z1-E681)

摘　　要：建立和优化了流式细胞术检测虾类血细胞活性氧含量的方法。以2′,7′-二氢二氯荧光黄双乙酸钠(DCFH-DA)为ROS特异探针,以斑节对虾(Penaeus monodon)血细胞为材料,用流式细胞仪检测不同染料浓度和不同染料孵育时间下血细胞的荧光强度、细胞形态特征和细胞活性的变化。结果表明,利用FCM检测虾类血细胞ROS含量的适宜的染料浓度和最佳的孵育时间分别为10μmol/L和30 min。In this study,a flow cytometric method used to measure the reactive oxygen species（ROS） production in shrimp haemocytes was improved.2′,7′-dichlorofluorescin（DCFH-DA） was used as a probe of ROS,and Penaeus monodon haemocyte was used as material.The cellular DCF fluorescent intensity,morphologic parameter and viability incubated with different doses of probe for different time were measured using flow cytometer.The results show that the optimal DCFH-DA concentration and incubation time for shrimp haemocyte ROS measurement using flow cytometry were 10 μmol/L and 30 min,respectively.

关 键 词：流式细胞术 活性氧 虾 血细胞 

分 类 号：Q95-336[生物学—动物学]