人脐静脉内皮细胞的原代培养及鉴定  

作　　者：孙慧琳[1] 湛奕[1] 刘珍珍[2] 李筠[2] 蔡德鸿[1] 

机构地区：[1]南方医科大学珠江医院内分泌科,广州510282 [2]广东药学院附属第一医院,广州510080

出　　处：《广东医学》2012年第6期744-746,共3页Guangdong Medical Journal

基　　金：广东省自然科学基金资助项目(编号:S2011010002074);广东省清远市科技计划立项项目(编号:2011B011112044)

摘　　要：目的建立一种能大量分离人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)体外培养模型,并对其进行鉴定,为体外血管内皮细胞及相关疾病的研究搭建桥梁。方法采用0.1%Ⅰ型胶原酶分离脐静脉内皮细胞,于M199培养基(含20%胎牛血清,80%M199不完全培养基,1%终浓度为50μg/mL内皮细胞生长复合物,1%终浓度为100μg/mL肝素钠,1%青-链霉素,1%L-谷氨酰胺)中培养,待细胞80%以上融合后,用0.25%的胰酶和0.25%的EDTA消化传代,并在倒置显微镜下观察细胞形态,用免疫荧光法对细胞进行鉴定。结果原代培养的HUVECs在24 h后完全贴壁,2～3 d可达80%的融合,倒置显微镜下观察细胞呈鹅卵石状排布,免疫荧光显示细胞胞浆中Ⅷ因子相关抗原阳性。结论 0.1%Ⅰ型胶原酶消化HUVECs方法便于操作,细胞获得量多且生长状态良好。

关 键 词：人脐静脉内皮细胞 细胞原代培养 Ⅷ因子相关抗原 

分 类 号：R285.5[医药卫生—中药学]