犬骨髓基质干细胞源性血管内皮样细胞的诱导分化及细胞特征鉴定  

作　　者：吕玉明[1] 程立明[2] 裴国献[3] 俞庆声[4] 蔡哲[4] 郭丽丽[4] 舒峻[4] 张可华[4] 

机构地区：[1]广州医学院第三附属医院骨科,广州510150 [2]中日友好医院关节外科,北京100029 [3]第四军医大学西京医院骨科,西安710032 [4]中日友好医院临床医学研究所免疫室,北京100029

出　　处：《广东医学》2012年第6期746-749,共4页Guangdong Medical Journal

基　　金：国家自然科学基金资助项目(编号:30772194)

摘　　要：目的采用血管内皮细胞生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)定向诱导犬骨髓基质干细胞(bone marrow stromal stem cells,BMSCs),探讨BMSCs向内皮细胞(endothelial cells,ECs)分化的潜能和内皮细胞的特征性鉴定方法。方法采集犬髂骨骨髓15～20 mL,全骨髓10%FBS DMEM培养液进行原代培养。将第2代纯化的BMSCs细胞悬液接种于含VEGF、bFGF的DMEM/F12培养液(细胞接种密度为1×106.mL-1)体外诱导培养。对细胞形态特征进行观察,对诱导分化的细胞行CD31、vWF、VEGFR-2荧光免疫蛋白检测。结果原代培养的BMSCs形态呈长梭形或不规则形,呈均匀分布生长。诱导分化后的细胞光镜下单层融合生长,呈铺路石样形态;电镜下细胞呈多边形,可见特征性的Weibel-Palade小体;经成血管内皮细胞诱导培养7～14 d后,BMSCs诱导分化细胞CD31、vWF和VEGFR-2的表达呈阳性。结论犬BMSCs易于体外分离培养及扩增,经VEGF、bFGF体外定向诱导后的细胞具有血管内皮细胞的特征且细胞纯度高、数量大。

关 键 词：骨髓基质干细胞 血管内皮样细胞 血管内皮细胞生长因子 成纤维细胞生长因子 

分 类 号：R318[医药卫生—生物医学工程]