人B淋巴细胞刺激因子融合蛋白的表达与功能鉴定  

作　　者：王婷婷[1] 王焱冰[2] 游思维[3] 王璇[4] 王东辉[5] 

机构地区：[1]辽宁医学院沈阳军区总医院研究生培养基地神经内科,辽宁沈阳110016 [2]中国科学院生物物理研究所,北京100101 [3]第四军医大学全军神经科学研究所,陕西西安710032 [4]中国中医科学院望京医院检验科,北京100102 [5]沈阳军区总医院医疗工程科,辽宁沈阳110016

出　　处：《细胞与分子免疫学杂志》2012年第4期433-435,共3页Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology

基　　金：国家自然科学基金资助项目(30872829)

摘　　要：目的:构建人B淋巴细胞刺激因子(hBAFF)的真核表达质粒,表达具有生物学功能的Fc-hBAFF融合蛋白。方法:PCR扩增hbaff胞外区编码基因,加入HA信号肽与hIgG1 Fc后,连入pTT3真核表达载体,采用磷酸钙法转染293T细胞。培养上清经蛋白G纯化后,SDS-PAGE与Westernblot鉴定目的蛋白的表达。流式细胞术检测Fc-hBAFF对人B细胞的增殖情况。结果:成功构建pTT3-HA-hIgG1 Fc-hBAFF融合表达质粒,体外大量表达纯化的Fc-hBAFF蛋白经SDS-PAGE与Western blot鉴定正确,并发现Fc-hBAFF蛋白对人外周血B细胞有明显促增殖作用。同时通过尾静脉高压注射的方式证实该质粒能在体内持续表达7 d。结论:体外表达并获得了具有生物学功能的Fc-hBAFF融合蛋白。

关 键 词：B淋巴细胞刺激因子 B细胞 自身免疫性疾病 

分 类 号：R392.12[医药卫生—免疫学]