昆明小鼠胚胎收集时间和培养液对囊胚内细胞团集落分离培养的影响  

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作  者:张翠平[1] 邱小燕[1] 肖雄[1] 赵海龙[1] 邓玉金[1] 李跃民[1] 

机构地区:[1]西南大学动物科技学院胚胎工程实验室,重庆400716

出  处:《中国畜牧杂志》2012年第7期26-28,共3页Chinese Journal of Animal Science

基  金:重庆市自然科学基金计划项目(CSTC;2009BB5301);西南大学基本科研业务费专项资金项目(XDJK2009C163);西南大学动物科技学院青年教师科研基金项目

摘  要:本研究旨在筛选获取优质ICM集落的实验方法。以昆明系小鼠为实验动物,采集3.5、4 d和4.5 d的胚胎,分别移入DMEM培养液、DMEM+白血病抑制因子(LIF)和小鼠胎儿成纤维细胞共培养体系中进行培养,观察比较内细胞团(ICM)从透明带中孵出的时间、孵化囊胚贴壁情况以及ICM集落形成情况。结果表明:妊娠3.5 d的胚胎61%为桑椹胚,需要经过4~5 d的体外培养才能形成ICM集落;妊娠4 d的扩张囊胚经过3~4 d的共培养后形成ICM集落;妊娠4.5 d的孵化囊胚经过1~2 d的共培养即可形成ICM集落;ICM形成率以妊娠4.5 d的胚胎最高,显著高于妊娠4 d和3.5 d的胚胎(P<0.01),但妊娠4.5 d冲出孵化囊胚数量显著降低(P<0.01);小鼠胎儿成纤维细胞共培养体系优于DMEM和DMEM+LIF培养液。因此,采集妊娠4 d的昆明小鼠胚胎,选择小鼠胎儿成纤维细胞共培养体系,在体外培养3~4 d,能够有效分离培养出可用于胚胎干细胞研究的优质ICM。

关 键 词:胚龄 培养液 ICM 昆明小鼠 

分 类 号:S814.8[农业科学—畜牧学]

 

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