棘孢木霉(Trichoderma asperellum)几丁质酶基因的克隆与生物信息学分析  

Cloning and Bioinformatics Analysis of Chitinase Gene Tachi1 from Trichoderma asperellum

作　　者：汤伟[1] 夏伟[1] 李雅华[1] 丛大鹏[1] 咸洪泉[1] 

机构地区：[1]青岛农业大学生命科学学院应用真菌实验室,青岛266109

出　　处：《中国生物化学与分子生物学报》2012年第4期385-392,共8页Chinese Journal of Biochemistry and Molecular Biology

基　　金：山东省自然科学基金项目(No.ZR2010CM040);青岛农业大学高层人才启动基金项目(No.631108)~~

摘　　要：几丁质酶作为木霉菌防治植物病虫害的主要因子,在生物防治和环境保护等领域发挥着重要的作用.为了研究棘孢木霉(Trichoderma asperellum)的生防机制并获得与其相关的功能基因,本研究通过RT-PCR、3'-RACE及5'-TAIL-PCR技术克隆了T.asperellum 1个几丁质酶基因Tachi1,对该基因进行了生物信息学分析,并利用毕赤酵母表达系统进行表达验证.Tachi1的DNA序列长1 635 bp,含有3个内含子,包含1 275 bp的开放阅读框,编码424个氨基酸;Tachi1属于糖基水解酶18家族内切几丁质酶,包含SIGGW底物结合位点和FDGIDXDWE活性中心位点,信号肽长度为22个氨基酸,成熟肽分子量为44 kD,二级结构以α-螺旋、β-折叠和无规则卷曲为结构元件,三级结构为(α/β)8的圆桶形结构.转Tachi1基因酵母工程菌可高效分泌表达几丁质酶Tachi1,甲醇诱导培养8 d几丁质酶酶活可达9.25 U/mL.

关 键 词：棘孢木霉 几丁质酶 克隆 表达 生物信息学分析 

分 类 号：Q78[生物学—分子生物学]