肝脏特异性表达分泌型IgD转基因小鼠模型的构建  

作　　者：王萍[1] 位治国[2] 焉博文[1] 黄甜[1] 苟克勉[1] 戴蕴平[1] 郑敏[1] 王美丽[1] 程学谦[1] 王喜凤[1] 许晨[1] 孙亿[1] 

机构地区：[1]中国农业大学生物学院,农业生物技术国家重点实验室,北京100193 [2]河南科技大学动物科技学院,河南471003

出　　处：《中国科学：生命科学》2012年第4期286-294,共9页Scientia Sinica(Vitae)

基　　金：国家重点基础研究发展计划(批准号:2010CB945300)资助项目

摘　　要：现有的遗传学研究认为高IgD综合征(HIDS)与甲羟戊酸激酶(MVK)基因发生突变有关,但具体的发病机制还不清楚,血清中IgD的升高与HIDS临床表征之间的关系还不知道.本研究运用融合PCR的方法构建肝脏特异性高表达嵌合分泌型IgD(csIgD)载体,并通过显微共注射,基因组PCR和Southern blotting鉴定出7只转基因F0代阳性小鼠.对F1代阳性小鼠在RNA和蛋白质水平分别进行了RT-PCR,Q-PCR和Western blotting,ELISA检测.结果显示,转基因csIgD能够在肝脏特异性表达,并具有遗传稳定性.对阳性小鼠骨髓和脾脏细胞进行的流式分析发现,转基因csIgD的表达并未影响到B细胞的发育.形态解剖学观察,发现一些小鼠出现了皮肤破损和肝脾肾肿大的现象;病理切片显示,肝脾肾组织出现大量的细胞坏死和纤维样蛋白沉淀.TAIL-PCR(thermal asymmetric in terlaced PCR)检测结果表明,目的基因片段没有破坏位于小鼠5号染色体的MVK基因.本转基因小鼠模型的构建,有利于进一步对HIDS发病机制进行探讨.

关 键 词：sIgD 肝脏特异性表达载体 HIDSMVK 

分 类 号：S865.13[农业科学—野生动物驯养]