河南长白猪白细胞介素18基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达  

作　　者：段永兰[1] 赵丽[2] 

机构地区：[1]河南工业贸易职业学院,郑州450000 [2]郑州牧业工程高等专科学校,郑州450011

出　　处：《黑龙江畜牧兽医》2012年第5期52-54,共3页Heilongjiang Animal Science And veterinary Medicine

基　　金：河南省科技攻关项目(2009B230016);河南省高校青年骨干教师资助项目(2011GGJS-194)

摘　　要：为了获取河南长白猪白细胞介素18(IL-18)基因的表达产物,试验从6月龄河南长白猪脾脏分离的淋巴细胞中提取总RNA,然后进行RT-PCR扩增,对扩增产物克隆、测序后获得河南长白猪IL-18基因成熟蛋白序列。利用基因重组技术将河南长白猪IL-18成熟蛋白编码区(500 bp)定向插入原核表达载体pQE30中,构建重组表达质粒pQE-pIL-18,转化大肠杆菌M15,并用异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导。结果表明:经序列分析,河南长白猪IL-18基因全长为500 bp;SDS-PAGE分析可检测到分子质量约为45 ku的重组蛋白。

关 键 词：河南长白猪 白细胞介素18(IL-18) 克隆 原核表达 

分 类 号：Q754[生物学—分子生物学]