19F型肺炎球菌荚膜多糖与载体蛋白P64K结合物的制备及免疫原性  

Preparation and immunogenicity of PN19F-rP64K conjugate vaccine and its evaluation in mice

作　　者：周觉非 姚静[1] 尹丹丹[1] 陈思[1] 杨溢尧 代洁[1] 张珂[1] 饶海林 李春阳[1] 江山[1] 张雪梅[1] 

机构地区：[1]成都生物制品研究所有限责任公司,成都610023

出　　处：《中国新药杂志》2012年第10期1131-1134,1185,共5页Chinese Journal of New Drugs

基　　金：国家国际科技合作项目(2012DFB33450)

摘　　要：目的:采用改良胺化还原法,重组B群脑膜炎球菌外膜蛋白(rP64K)作为载体蛋白,制备19F型肺炎球菌荚膜多糖(PN19F)结合物。方法:在胺化还原法的基础上,以1,6-己二酰肼(ADH)为分子臂,在碳二亚胺(EDAC)作用下衍化rP64K,蛋白衍化后再与多糖上的醛基反应,形成共轭结合。采用HPLC、电泳、免疫印迹等方法分析结合物,并将获得的结合物免疫NIH小鼠,用ELISA方法检测多糖IgG水平。结果:电泳和免疫印迹证明了结合物制备成功。动物免疫产生了高滴度的抗PN19F的抗体,并有免疫记忆发生。结论:新的结合方法和新的载体蛋白能有效提高结合效率,以本工艺制备PN19F蛋白结合疫苗是可行的。Object： Utilize improved reductive animation （RA） method to prepare pneumococcal polysaccharide （PN19F polysaccharide） conjugate vaccine, using recombinant group B Meningcoccus membrane protein （rP64K） as carrier protein. Methods： The oxidized PN19F PS was chemically bound to rP64K via a linker, adipic acid dihydrazide （ADH）. The existence of conjugates were confirmed by HPLC, SDS-PAGE and colorimetric assays. The immunogenicity of the conjugate was evaluated in NIH mice and the sera were analyzed using indirect ELISA. Results： The conjugates induced higher level of anti-PN19F immune response than both native PN19F and Prevnar in mice. Conclusion： The new conjugation method and new carrier protein can be used in Pneumococcal polysaccharide （PN19F polysaccharide） conjugate vaccine.

关 键 词：19F型肺炎球菌荚膜多糖 重组B群脑膜炎球菌外膜蛋白 结合疫苗 改良胺化还原法 免疫原性 

分 类 号：R186[医药卫生—流行病学]