凋亡素VP3蛋白的原核表达及纯化  

作　　者：邓守恒[1] 柯贤柱[1] 石小燕[2] 蔡召忠[1] 杨敬宁[3] 黄永章[1] 陈萍[1] 

机构地区：[1]湖北医药学院附属人民医院肿瘤中心,湖北十堰442000 [2]武汉市中心医院 [3]湖北医药学院免疫教研室

出　　处：《山东医药》2012年第17期42-43,共2页Shandong Medical Journal

基　　金：湖北省卫生厅青年基金资助项目(QJX2008-42);湖北医药学院创新基金项目(2010XSA02);十堰市科技局基金项目(2010st24)

摘　　要：目的构建凋亡素VP3蛋白的原核表达质粒,并进行诱导表达和蛋白纯化。方法采用PCR法自PGEX-6P-1/TAT-VP3质粒中扩增VP3基因,运用靶向克隆酶将VP3基因插入线性pET15b,构建重组表达质粒pET-15b-VP3;经测序证实构建成功后转化E.coli Rosetta,表达凋亡素VP3蛋白;经Ni-NTA树脂亲和层析,对纯化产物进行SDS-PAGE、Western blotting分析鉴定。结果成功构建凋亡素VP3蛋白原核表达质粒,表达并纯化了分子量为13.6 kD的凋亡素VP3蛋白。结论凋亡素VP蛋白原核表达载体的构建及目的蛋白的表达纯化,为体内应用凋亡素VP3蛋白进行抗肿瘤研究奠定了基础。

关 键 词：凋亡素 VP3 分离 提纯 

分 类 号：R318[医药卫生—生物医学工程]