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作 者:周清[1] 杨筱曦[1] 阮余霞[1] 蔡小芳[2] 陈剑[1]
机构地区:[1]暨南大学附属第一医院眼科,广东广州510630 [2]暨南大学暨南大学化学系,广东广州510630
出 处:《细胞与分子免疫学杂志》2012年第5期503-505,509,共4页Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology
基 金:国家自然科学基金(30872808);国家自然青年科学基金(81100637);暨南大学青年基金(51208020)
摘 要:目的:建立体外培养及标记人羊膜上皮细胞(HAECs)的方法并应用原子力显微镜(AFM)从细胞形貌变化上探讨人羊膜上皮细胞向角膜上皮细胞转分化的可视性研究。方法:取足月产人羊膜,采用酶消化法获得HAECs进行原代和传代培养,对培养的细胞进行形态学观察和鉴定;HAECs与兔角膜基质细胞共培养2周,采用CK3+12免疫荧光细胞化学染色鉴定诱导后的细胞;应用AFM分别对共培养前后的人羊膜上皮细胞的表面超微结构进行观察,并与人角膜上皮细胞(HCECs)对比,分析细胞形貌的变化。结果:HAECs体外培养呈铺路石样外观,核/质比率小,连接成片。细胞形态为多角形,角蛋白keratin表达阳性,不表达CK3+12;免疫荧光显示共培养2周的HAECs表达CK3+12;AFM观察,共培养2周后HAECs细胞核中央由山谷样外观转变成类似HCECs的山峰样外观。结论:HAECs可成功进行原代和传代培养,在兔角膜基质细胞诱导培养条件下可向角膜上皮细胞转分化。
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