黄瓜悬浮细胞蛋白质组双向电泳分析技术  

Optimization of Two-dimensional Electrophoresis for Proteome of Cucumber Suspension Cultured Cells

作　　者：郝宇涵[1] 范海延[1,2] 曲波[1] 许玉凤[1] 崔娜[1] 李楠[1] 任婧祺[1] 

机构地区：[1]沈阳农业大学生物科学技术学院,沈阳110866 [2]沈阳农业大学设施园艺省部共建教育部重点实验室,沈阳110866

出　　处：《西北植物学报》2012年第4期823-828,共6页Acta Botanica Boreali-Occidentalia Sinica

基　　金：国家自然科学基金(30700542);沈阳市科学技术计划(F10-205-1-04);沈阳农业大学"中青年拔尖人才"项目

摘　　要：为建立适于黄瓜悬浮细胞蛋白质组分析的双向电泳体系,对黄瓜悬浮细胞蛋白质双向电泳分析所采用的胶条pH范围、样品制备方法、裂解液配方及分离胶浓度等参数进行研究。结果表明,采用pH范围为4～7的IPG胶条,直接裂解后丙酮沉淀法制备黄瓜悬浮细胞蛋白质,裂解液为8mol/L尿素、2mol/L硫脲、2%IPG Buffer、4%CHAPS、1%TBP、65mmol/L DTT、2mmol/L EDTA、0.001%溴酚蓝和1%鸡尾酒,分离胶浓度为11%,可获得蛋白质点分离清晰的双向电泳图谱。To obtain suitable protocol for proteome of cucumber suspension cultured cells, we optimized the pH gradient of IPG strip, the method of protein extraction,reagent and concentration of lysis buffer and SDS-PAGE condition. Results showed pH 4～7 IPG strips,the extraction method acetone precipitation af- ter lysis,lysis buffer containing 8 mol/L urea,2 mol/L thiourea,2% IPG Buffer,4% CHAPS,1% TBP,65 mmol/I. DTT,2 mmol/L EDTA,0. 001% bromophenol blue and 1%cocktail and 11% gel concentration were appropriate for the sample preparation of cucumber suspension cultured cells.

关 键 词：黄瓜 悬浮细胞 蛋白质组 双向电泳 

分 类 号：Q503[生物学—生物化学]