接骨草ISSR扩增条件优化  

作　　者：王兴龙[1,2] 金则新[2] 李钧敏[2] 徐兴利[2,3] 

机构地区：[1]杭州师范大学生命与环境科学学院,浙江杭州310018 [2]台州学院生态研究所,浙江临海317000 [3]西南大学三峡库区生态环境教育部重点实验室,重庆400715

出　　处：《江苏农业科学》2012年第4期49-51,共3页Jiangsu Agricultural Sciences

基　　金：浙江省自然科学基金(编号:Y3080460)

摘　　要：采用改进的SDS法提取接骨草叶片中的基因组DNA,通过单因素试验对接骨草ISSR反应体系中的模板DNA用量、引物用量、dNTP用量、牛血清白蛋白浓度、Taq DNA聚合酶用量、Mg^(2+)浓度等进行筛选和优化,得到适合接骨草ISSR扩增的条件,10μLPCR反应体系:1×Taq酶配套缓冲液,4 ng模板DNA,1.5μmol/L引物,0.2 mmol/LdNTP,2 mg/mL BSA,0.75 U Taq DNA聚合酶,2 mmol/L Mg^(2+)。利用优化后的反应体系从100个ISSR引物中筛选出12个重复性好、稳定性高的引物对24个接骨草个体的DNA进行扩增,共得到111个位点,其中103个为多态位点,多态位点百分率为92.79%,Nei指数为0.402 6,Shannon信息指数为0.579 0,表明接骨草的遗传多样性水平很高。

关 键 词：接骨草 DNA ISSR优化 遗传多样性 

分 类 号：S567[农业科学—中草药栽培]