豌豆ISSR-PCR反应体系的建立和优化  

Establishment and Optimization of ISSR Reaction System for Pea

作　　者：曾亮[1] 李敏权[1,2] 杨晓明[2] 赵丽娟[2] 杨发荣[2] 

机构地区：[1]甘肃农业大学草业学院,兰州730070 [2]甘肃省农业科学院,兰州730070

出　　处：《草地学报》2012年第3期536-539,共4页Acta Agrestia Sinica

基　　金：现代农业食用豆产业技术体系专项(CARS-09);国家自然科学基金(31160304)资助

摘　　要：以豌豆(Pisum sativum L.)DNA为材料,对影响其ISSR-PCR反应体系中的5种主要因素(模板DNA量、引物浓度、dNTPs浓度、Taq酶量、退火温度)进行优化,最终确定了豌豆ISSR-PCR反应的最佳体系(20μL)为:15ng模板DNA,0.15mmol.L-1dNTP,0.5μmol.L-1ISSR引物,1UTaq DNA聚合酶,引物842号的最适退火温度为50℃。该体系的建立为今后利用ISSR技术进行豌豆属种质资源的遗传多样性分析、遗传图谱构建和基因定位奠定了技术基础。The optimum ISSR-PCR system for peas is established using ISSR-PCR amplification with five factors（DNA template,primer,dNTPs,Taq DNA polymerase and annealing temperature）.The optimum reaction system（20 μL） contains 15 ng DNA template,0.15 mmol·L-1 dNTP,0.5 μmol·L-1 ISSR primer,1U Taq DNA polymerase.The suitable annealing temperature of primer 842 is 50℃.This reaction system will provide a technological base for genetic diversity analysis of pea germplasm,genetic map construction and gene location.

关 键 词：豌豆 ISSR PCR反应体系 优化 

分 类 号：Q943[生物学—植物学]