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作 者:王正荣[1] 薄新文[1] 赵文娟[1] 何延华[1] 康立超[1]
机构地区:[1]新疆农垦科学院新疆绵羊重点繁育实验室,新疆石河子832000
出 处:《中国兽医科学》2012年第6期566-571,共6页Chinese Veterinary Science
基 金:国家"973"前期研究专项(2006CB708512);新疆生产建设兵团杰出青年创新资金专项(2011CD005);家畜疫病病原生物学国家重点实验室2011年度开放基金课题(SKLVEB2011KFKT008)
摘 要:为了研究电压门控性钙通道β亚基和胶原纤维基因在扩展莫尼茨绦虫不同体节的mRNA转录水平,以beta-Tubulin基因作为内参基因,采用SYBR Green real-time RT-PCR方法检测该基因在扩展莫尼茨绦虫4个不同发育阶段即头节、幼节、成节、孕节中的表达差异。结果显示,电压门控性钙通道β亚基、胶原纤维基因和beta-Tubulin基因的Ct值与阳性质粒的浓度均呈良好的线性关系,相关系数均大于0.99;熔解曲线分析表明,产物为特异的单峰,具有较高的特异性。试验结果表明,电压门控性钙通道β亚基以及胶原纤维基因在虫体各发育阶段中的表达丰度存在差异。电压门控性钙通道β亚基在幼节的表达水平较高,而胶原纤维基因在孕节的表达水平较高,提示这2个基因可能在幼节和孕节的发育中有重要作用。In the present study,we developed a SYBR Green real-time fluorescent quantitative PCR assay to explore the mRNA transcription of voltage gated calcium channel fl subunits and collagen fibers in different segments of Moniezia expansa, with beta-Tubulin as an interna control. In result, a good linear relationship(〉0. 99) between the Ct value and the concentration of positive plasmid for each gene were found. The melting curve analysis showed the product was specific to a single peak, with high specificity. Real-time PCR results showed that the expression abundance of voltage gated calcium channel β subunits and collagen fibers were different, the voltage gated calcium channel β subunits was high in immature segment,but the collagen fibers was high in gravid segment. This phenomenon showed that the voltage gated calcium channel β subunits and collagen fibers may play a key role in the development of immature segment.
关 键 词:扩展莫尼茨绦虫 电压门控性钙通道β亚基 胶原纤维 mRNA转录水平
分 类 号:S852.734[农业科学—基础兽医学]
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