棉铃虫核型多角体病毒orf80多克隆抗体的制备  

Preparation of Polyclonal Antibody of Helicoverpa armigera Single-nucleopolyhedrovirus orf80

作　　者：徐利[1,2] 吕婷婷[1] 甘恩宇[1,2] 高秋荣[2] 王敦[2] 

机构地区：[1]西北农林科技大学生命科学学院,陕西杨凌712100 [2]西北农林科技大学植保资源与利用教育部重点实验室,陕西杨凌712100

出　　处：《西北农业学报》2012年第4期193-196,共4页Acta Agriculturae Boreali-occidentalis Sinica

基　　金：国家自然科学基金(30872033);西北农林科技大学农业科技创新专项(CX200907)

摘　　要：从HearNPV G4株基因组中克隆得到orf80基因的全序列,将该基因构建于pMAL-c4E载体并在TB1中融合表达,orf80融合表达蛋白分子质量为73.3ku,与预测的蛋白一致,Western blot验证正确。纯化融合蛋白后制备抗原并注射新西兰大白兔从而得到orf80的多克隆抗体,经ELISA检测其效价达到2.56×105,表明该抗体具有较高的免疫原性,可用于orf80编码蛋白的检测及蛋白互作等相关研究。Abstract： The HearNPV orf80 was cloned from Helicoverpa armigera Single-nucleopolyhedrovirus （HearNPV） G4 genome by PCR and the prokaryotic expression vector pMAL-c4E-Ha80 was con- structed. The recombinant plasmid was transformed into the Escherichi coli TB1 to express the MBP- HaS0 fushion protein. Purified MBP-Ha80 protein was injected into rabbits as antigen to prepare the polyclonal antibodies of orf80. The titer of anti-HearNPV off80 polyclonal antibodies was 2.56 × 10^5 detected by ELISA. The prepared antibodies can be used to determine orf80 coding protein in the re- search of protein detection and protein interaction.

关 键 词：棉铃虫核型多角体病毒 orf80 多克隆抗体 ELISA 

分 类 号：S476[农业科学—农业昆虫与害虫防治] Q789[农业科学—植物保护]