A型口蹄疫病毒VP3基因的克隆及原核表达  

作　　者：刘航[1] 杨晓燕[1] 刘明[1] 赵海波[1] 郭华花[1] 田永强[1] 

机构地区：[1]兰州交通大学化学与生物工程学院,甘肃兰州730070

出　　处：《江苏农业科学》2012年第6期33-35,共3页Jiangsu Agricultural Sciences

摘　　要：从实验室冻存的含A型口蹄疫病毒的细胞中提取FMDV总RNA,通过RT-PCR获得cDNA。并根据FM-DV全基因组序列设计了1对针对VP3基因的引物,通过PCR扩增得到目的基因VP3并亚克隆入pMD 18-T载体。将鉴定出的阳性质粒和表达载体PET32a用BamHⅠ、HindⅢ双酶切回收后连接,获得阳性重组质粒PET32-VP3。用IPTG诱导重组质粒表达目的蛋白VP3,并用SDS-PAGE进行检测,表达产物用镍亲和树脂进行纯化。结果证明口蹄疫病毒VP3蛋白在大肠杆菌中获得了高效表达且表达产物得到了纯化,为实验室进一步研究提供了重要的材料。

关 键 词：A型口蹄疫病毒 VP3基因 克隆 原核表达 

分 类 号：Q786[生物学—分子生物学]