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机构地区:[1]安徽医科大学附属省立医院眼科,安徽省合肥市230001
出 处:《眼科新进展》2012年第6期521-524,共4页Recent Advances in Ophthalmology
基 金:安徽医科大学校科研基金项目资助(编号:2010xkj080)~~
摘 要:目的研究α-氰基-(3,4-羟基)-N-苄苯乙烯胺(AG490)对体外培养的豚鼠巩膜成纤维细胞(guinea pig scleral fibroblast,GSF)生长状态的影响。方法选取原代培养传3-4代的GSF用于实验,应用台盼蓝染色、四甲基偶氮唑盐比色法和流式细胞仪检测和观察不同浓度(0μmol·L-1、15μmol·L-1、25μmol·L-1、50μmol·L-1、75μmol·L-1)AG490对体外培养的GSF生存活力和细胞增殖力以及细胞周期的影响。结果 15μmol·L-1、25μmol·L-1AG490对体外培养的GSF干预48h,细胞存活率为94.6%和94.1%,与0μmol·L-1AG490(95.5%)比较差异均无统计学意义(均为P>0.05);且均未见促进或抑制细胞增殖能力的作用,与0μmol·L-1AG490组比较差异亦均无统计学意义(t=3.91、3.89,均为P>0.05)。25μmol·L-1AG490作用GSF细胞48h后,G1期和S期细胞百分比及细胞增殖指数与0μmol·L-1AG490比较差异均无统计学意义(均为P>0.05)。结论一定浓度范围(≤25μmol·L-1)的AG490对正常GSF的存活率和增殖能力及细胞周期没有明显影响,提示AG490作为一种特异性的阻断JAK2/Stat3信号转导通路的酪氨酸酶受体抑制剂,对正常生理情况下的细胞(几乎没有Stat3磷酸化形式存在)没有明显的毒副作用。Objective To investigate the effect of tyrphostin AG490 on guinea pig scleral fibroblasts (GSF) growth in vitro. Methods The primary cultured third and fourth generation GSF were collected. The effects of AG490 with different concentra- tions (0μmol·L^-1、15μmol·L^-1、25μmol·L^-1、50μmol·L^-1、75μmol·L^-1) on cell survival activity, proliferation and cell cycle were determined by MTT assay and flow cytometry. Results The cell survival rate after interfered by 15μmol·L^-1、25μmol·L^-1AG490 of 48 hours were 94.6% and 94. 1% ,eompared with 0 μmol·L^-1 AG490 (95.5%) ,there was no statistical difference ( both P 〉 0.05 ) ; Compared with 0 μmol·L^-1 AG490,there was no statistical difference in promoting or inhibiting the cell proliferation ( t = 3.91,3.89, both P 〉 0.05 ). After interfered by 25μmol·L^-1 AG490 of 48 hours,there was no statistical difference in G1 and S staged cell percentage,prolifer- ative index compared with 0μmol·L^-1 AG490 ( both P 〉 0.05 ). Conclusion AG490 at certain concentration( less than or equal to 25 μmol·L^-1 )has no obviously effect on survival rate, proliferation and cell cycle of normal GSF, which showed that AG490 has no significantly side-effect on normal scleral fibroblast cells as an JAK2/Stat3 signal pathway inhibitor.
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