高滴度感染力H5N1亚型禽流感病毒假病毒颗粒的制备  

Establishing a High-titer Infectious Avian Influenza A(H5N1) Pseudotyped Viral Particle

作　　者：刘熙君[1,2] 郭志平[2,3] 沈立萍[2] 王岳[2] 史海燕[1,2] 张国辉[2] 张寻[2] 毕胜利[2] 赵洪兰[2] 

机构地区：[1]温州医学院检验医学院暨生命科学院医学病毒学研究所,温州325035 [2]中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所,北京100052 [3]北京市第三十五中学,北京100032

出　　处：《病毒学报》2012年第4期324-329,共6页Chinese Journal of Virology

基　　金：传染病防治重大专项(No.2009ZX10004-711)

摘　　要：利用一个瞬时共转染系统,将H5N1亚型禽流感病毒的血凝素(Hemagglutinin,HA)蛋白与神经氨酸酶(Neuraminidase,NA)蛋白整合到鼠白血病病毒假病毒颗粒表面,包装成表达HA与NA的假病毒颗粒,通过透射电子显微镜形态学观察、感染滴度分析、血凝试验和中和试验研究其生物学特性。研究获得了高滴度感染力的H5N1假病毒颗粒(H5N1Pseudotyped particle,H5N1Pp),H5N1Pp的感染力滴度为108Pp/mL,形态、血凝活性及中和特性均与野生H5N1病毒相似,结果为H5N1病毒受体、HA与NA的功能、中和抗体、抗病毒药物开发研究的开展建立了平台。A transient four-plasmid cotransfection system was used to construct avian influenza A （H5N1） pseudotyped viral particle （H5NIPp） by incorporating hemagglutinin（HA） protein and neuraminidase （NA） protein from HSN1 avian influenza virus onto Murine leukemia virus pseudotyped viral particles, the transmission electron microscopy, infectivity titer assay, hemagglutination assay, neutralization assay of HSN1Pp were studied. We established a pseudotyped HSN1 viral particle at a high titer of 108Pp/mL, the morphology,the hemagglutination activity and neutralization specificity of HSNIPp is simililar to wild HSNlvirus. The research result sets a platform for studying this virus, including its receptors, the functional analysis of HA and NA, neutralizing antibodies and anti-H5N1 drug development.

关 键 词：鼠白血病病毒 禽流感病毒 H5N1亚型 假病毒 血凝素 神经氨酸酶 

分 类 号：Q786[生物学—分子生物学] R373.13[医药卫生—病原生物学]