一步式IC-RT-PCR同时检测2种兰花病毒的探讨  

作　　者：章鹏程[1] 陈芝娟[1] 杨科府[1] 邓衍福[1] 施农农[1] 

机构地区：[1]杭州师范大学生命与环境科学学院植物RNA信号传导研究中心/杭州市药用观赏植物重点实验室,浙江杭州310036

出　　处：《浙江农业科学》2012年第8期1165-1168,共4页Journal of Zhejiang Agricultural Sciences

基　　金：国家自然科学基金(30770185);杭州市科技局重点实验室创新基金(20090230T05)

摘　　要：齿兰环斑病毒(Odontoglossum ring-spot virus,ORSV)和建兰花叶病毒(Cymbidium mosaic virus,CymMV)复合侵染兰科植物的现象在自然界中非常普遍。通过设计一对简并引物可以同时扩增获得复合感染的兰科植物中两种病毒核酸片段(CymMV约558 bp,ORSV约825 bp),由此建立一步式免疫捕获-反转录-聚合酶链式反应(IC-RT-PCR)技术以检测2种病毒的复合侵染情况。利用该技术对来自广东汕头的35株兰样进行感病性测试,发现31株呈阳性,感病率为88%。阳性株中,ORSV感染率为87%(27株),CymMV感染率为29%(9株),复合感染率16%(5株),说明这一地区ORSV感病率较高,并与CymMV存在明显复合感染。扩增条带T载体克隆测序表明,与已知CymMV和ORSV分离物的核酸分子平均同源性分别高达97%和99%。

关 键 词：IC-RT-PCR 齿兰环斑病毒 建兰花叶病毒 简并引物 

分 类 号：S432.4[农业科学—植物病理学]