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作 者:陈哲宇[1] 黄爱军[1] 何成[1] 路长林[1] 吴祥甫[2]
机构地区:[1]第二军医大学基础医学部神经生物学教研室,上海200433 [2]中国科学院上海生物化学研究所
出 处:《第二军医大学学报》2000年第5期401-405,共5页Academic Journal of Second Military Medical University
基 金:国家重点基础研究发展规划项目(973项目)资助!(19990 54005)
摘 要:目的 :对汉族人胶质细胞源性神经营养因子 (GDNF)前体 c DNA进行核苷酸序列分析及功能研究。 方法 :通过RT- PCR法扩增汉族人 GDNF前体 c DNA ,利用昆虫杆状病毒表达系统 (BES)表达此前体 c DNA,原代培养中脑多巴胺能神经元对表达产物进行活性测定。结果 :汉族人 GDNF前体 c DNA为截短的 5 5 5 bp的转录体 ,其在昆虫细胞中的分泌表达产物能促进多巴胺能神经元的存活和分化。 结论 :汉族人 GDNF前体 c DNA序列与文献报道的 6 33 bp的序列相比缺失了 78个碱基 ,此 78个碱基的缺失并不影响人Objective:To study the sequence and function of the Han nationality GDNF precursor cDNA. Methods:The Han nationality GDNF precursor cDNA was amplified by RT PCR and expressed by baculovirus expression system. The biological activity of the expressed product was measured by the primary culture of midbrain dopaminergic neurons. Results:There existed shorter GDNF transcript of 555 bp in the Han nationality. The secretory expression product of the cDNA in insect cells could promote the survival and differential of dopaminergic neurons. Conclusion:It is found that there is a 78 bp deletion in the Han nationality GDNF precursor cDNA compared with the reported 633 bp GDNF precursor cDNA. The 78 bp deletion does not affect the secretory expression and biological activity of GDNF mature protein.
关 键 词:胶质细胞源性神经营养因子 基因克隆 CDNA 序列
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