家蚕G蛋白α亚基基因BmGα73B原核表达及其表达条件优化  

作　　者：汤强[1] 方玲[1] 章玉萍[2] 

机构地区：[1]芜湖职业技术学院,安徽芜湖241003 [2]安徽省农业科学院蚕桑研究所,安徽合肥230061

出　　处：《中国蚕业》2012年第3期19-22,共4页China Sericulture

基　　金：安徽省高校自然科学基金项目(编号KJ2012B218);安徽省农业科学院院长青年创新基金项目(编号11B0625);安徽省芜湖职业技术学院博士科研启动基金项目

摘　　要：通过RT-PCR技术从家蚕中扩增出G蛋白α亚基基因BmGα73B的cDNA,克隆至原核表达载体pET-41b(+)中,所获得的重组质粒经酶切鉴定后,将其转化至E coli BL21诱导表达,用SDS-PAGE与Western blot对表达产物进行鉴定。结果表明,通过RT-PCR扩增获得长度为1 158 bp的蛋白基因,诱导表达重组质粒pET-41b(+)-Gα73B,经SDS-PAGE检测,IPTGr的终浓度为1 mmol/L时,诱导4 h时蛋白表达量最高,出现分子质量约为73 kD的目的蛋白带,与蛋白的理论值相符。经Western blot检测,表达产物可与GST发生特异性反应。

关 键 词：G蛋白α亚基 BmGα73B RT-PCR 克隆 原核表达 

分 类 号：S881.26[农业科学—特种经济动物饲养]