快速检测人新甲型H1N1、季节性和乙型流感病毒多重PCR方法的建立  

作　　者：孙菲 李文悌[2] 欧新华[3] 王晓春[2] 

机构地区：[1]湖南国际旅行卫生保健中心综合实验室,长沙410016 [2]中南大学湘雅医学院医学检验系,长沙410013 [3]湖南省长沙市疾病预防控制中心微生物科,410001

出　　处：《广东医学》2012年第18期2731-2733,共3页Guangdong Medical Journal

基　　金：湖南省科技计划项目(编号:2011SK3260);湖南省出入境检验检疫局科技项目(编号:2009hnk001);长沙市科技计划项目(编号:K0904150-11)

摘　　要：目的建立一种可以同时检测人类新甲型H1N1、季节性H1N1和H3N2亚型流感病毒及乙型流感病毒的多重PCR方法。方法根据以上4种流感病毒的特异性基因设计4对引物,建立可同时扩增出4个流感病毒特异性片段的多重PCR的方法。用人的GAPDH基因作为内参判断标本来源和实施质量控制的依据。并进行敏感性、特异性和盲样检测评价实验。结果该方法可同时扩增出流感病毒亚型的HA基因片段长度分别为106 bp(新甲型H1N1)、135 bp(季节性H1N1)、118 bp(季节性H3N2)、170 bp(乙型流感病毒)。该实验检测新甲型H1N1(A/colifornia/07/2009)的敏感性为102copies/反应。特异性实验结果显示每对引物只检测对应的病毒,32份盲样检测结果特异性好。结论该多重PCR方法可同时检测新甲型H1N1及季节性流感病毒,敏感性、特异性强,可用于人类流感病毒的鉴别分型检测。

关 键 词：人流感 新甲型H1N1 多重PCR 检测 

分 类 号：R511.7[医药卫生—内科学]