shRNA抑制Nanog基因的表达对胃癌细胞SGC-7901分子生物学行为的影响  

作　　者：季文[1] 姜政[1] 菜璨[1] 刘波[1] 胡在敏[1] 亢渝俊[1] 王川[1] 袁媛[1] 

机构地区：[1]重庆医科大学附属第一医院消化内科,重庆400016

出　　处：《细胞与分子免疫学杂志》2012年第10期1073-1077,1080,共6页Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology

摘　　要：目的:利用RNA干扰技术构建并筛选出对Nanog基因有抑制作用的重组质粒pshRNA-Nanog,转染入胃癌细胞SGC-7901中,检测其对Nanog表达的影响及其对胃癌细胞SGC-7901的增殖、周期、凋亡以及迁移的影响。方法:构建出针对人Nanog基因构建出的干扰质粒pshRNA-Nanog,在脂质体的介导下将其转染胃癌细胞SGC-7901,通过荧光显微镜,RT-PCR和Western blot法检测其表达,筛选出抑制率最高的一组;将筛选出的转染效率最高的一组pshRNA-Nanog重组质粒转染胃癌细胞SGC-7901中,通过CCK-8检测其胃癌细胞SGC-7901增殖情况,流式细胞仪分析SGC-7901周期变化和凋亡情况,Transwell迁移实验验证Nanog对SGC-7901的迁移能力以及侵袭实验验证Nanog对SGC-7901侵袭能力的影响。结果:成功构建并筛选出了对胃癌细胞SGC-7901干扰效果最明显的一组重组质粒;细胞的增殖受到抑制,胃癌细胞侵袭能力及迁移能力减弱,细胞周期停滞在S期,细胞的凋亡明显增加。结论:Nanog基因与胃癌细胞的增殖能力、周期及凋亡、迁移和侵袭能力有密切的关系。

关 键 词：胃癌 NANOG 细胞凋亡 细胞迁移 SHRNA 

分 类 号：R392-33[医药卫生—免疫学]