滑叶藤ISSR-PCR反应体系建立及优化  

Establishment and Optimization of ISSR-PCR Reaction System for Clematis fasciculifloora Franch.

作　　者：孙正海[1] 王锦[1] 李世峰[2] 林开文[1] 胡祎晨[1] 王仕锦[1] 

机构地区：[1]西南林业大学园林学院,云南昆明650224 [2]云南省农业科学院花卉研究所,云南昆明650205

出　　处：《云南农业大学学报（自然科学版）》2012年第5期746-750,共5页Journal of Yunnan Agricultural University:Natural Science

基　　金：云南省应用基础研究项目(2010ZC089);国家林业局"948"项目(2008-4-11);云南省省部级重点学科;省高校重点实验室及校实验室共享平台资助项目;西南林业大学科技创新基金

摘　　要：为建立和优化滑叶藤ISSR-PCR反应体系,运用正交试验和单因子试验分析模板DNA,TagDNA聚合酶,Primer,Mg2+和dNTPs 5个因子对滑叶藤ISSR-PCR反应影响。结果表明了滑叶藤ISSR-PCR 25μL反应体系中5个因子最佳水平:DNA模板为8.4 ng,TagDNA聚合酶为2.0 u,Primer浓度为0.8 mmol/L,dNTPs浓度为0.68 mmol/L,Mg2+浓度为2.4 mmol/L。该反应体系为利用ISSR分子标记技术研究铁线莲属植物提供了可靠方法。Effect for ISSR-PCR reaction of Clematis fasciculifloora Franch. on five factors （DNA tern-plate, TagDNA, primer, Mg^2＋ and dNTPs） were analyzed by orthogonal design and respective factor design for establishing and optimizing ISSR-PCR reaction system of C. fasciculifloora Franch.. As aresult, the optimal ISSR-PCR reaction system （25 μL） mixture contained 8.4 ng DNA template, 2.0 u TagDNA, 0. 8 mmol/L primer, 2.4 mmol/L Mg^2＋ and 0. 68 mmol/L dNTPs. Theory sustaining forstudying Clematis L. plant by ISSR molecular marker were afforded from this experiment.

关 键 词：滑叶藤 ISSR-PCR反应 体系优化 

分 类 号：S687.2[农业科学—观赏园艺]