胰蛋白酶处理对大豆下胚轴质膜H^+-ATPase的影响  

THE EFFECT OF TRYPSIN TREATMENT ON PLASMA MEMBRANE H^+-ATPase FROM SOYBEAN HYPOCOTYLS

作　　者：张楠[1] 邱全胜[1] 

机构地区：[1]北京师范大学生命科学学院,北京100875

出　　处：《北京师范大学学报（自然科学版）》2000年第3期390-393,共4页Journal of Beijing Normal University(Natural Science)

基　　金：国家"九七三"计划资助项目;国家自然科学基金资助项目!(39770 0 77)

摘　　要：以大豆下胚轴为材料 ,采用蔗糖密度梯度法制备高纯度质膜微囊 ,研究了胰蛋白酶处理对质膜H+ ATPase的影响 .结果表明 ,温和胰蛋白酶处理可刺激ATPase的水解活性 ;并且发现酶切处理可以提高PNPP的水解活性 ,当PNPP浓度在 10 30mmol·L- 1范围内 ,PNPP水解活性提高2 1% 2 8% .动力学分析表明 ,酶切处理后PNPP水解的Km值也由 2 .6 6降低到 1.4 4mmol·L- 1;同时发现酶切处理降低了钒酸钠对ATPase的抑制效应 ,显示胰蛋白酶处理可能改变了磷酸酶结构域的结构而影响ATPase的催化效应 ,暗示C 末端调节着磷酸酶结构域的结构和功能 .The effect of trypsin treatment on plasma membrane H- + -A TPase is studied using plasma membrane vesicles purified from soybean hypocotyls by sucrose gradient centrifugation method. Results show that under mild trypsin treatment the ATPase hydrolysis activity increases and optimum pH value moves f rom 6.5 to 7.0. PNPP hydrolysis activity is stimulated as well under trypsin tre atment. In the presence of 10~30 mmol·L- -1 PNPP, the PNPP hydroly sis activity of the cleaved ATPase increases by 21%~28%. Kinetic studies ind icate that the K m values for PNPP hydrolysis is reduced from 2.66 to 1 .44 mmol·L- -1 by proteolysis. Taken together, the structure and a ctivity of the phosphatase domain are affected by trypsin treatment, implying th at this domain might be regulated by the C-terminal end of plasma membrane H- +-ATPase.

关 键 词：大豆 下胚轴 质膜H^+-ATPASE 胰蛋白酶处理 

分 类 号：Q73[生物学—分子生物学]