四倍体菘蓝ISSR-PCR反应体系优化与遗传差异分析  

作　　者：段英姿[1] 

机构地区：[1]唐山师范学院生命科学系,河北唐山063000

出　　处：《江苏农业科学》2012年第9期36-39,共4页Jiangsu Agricultural Sciences

基　　金：河北省唐山市科技攻关项目(编号:04360701B-10)

摘　　要：采用单因子试验,研究引物、dNTPs、Mg2+、Taq DNA聚合酶及退火温度对PCR扩增的影响,用其建立优化四倍体菘蓝的ISSR-PCR反应体系,分析不同四倍体菘蓝株系的遗传差异性。结果发现ISSR-PCR最佳反应体系为:在25μL的反应体系中,引物浓度为0.76μmol/L,dNTPs浓度为190μmol/L,MgCl2浓度为200μmol/L,Taq DNA聚合酶用量为1.5 U,模板DNA浓度为20 ng/μL;确定了不同引物最佳退火温度;菘蓝株系间具有中等偏高的遗传差异性,多态性条带达58.22%。表明采用单因子试验可以快速建立ISSR-PCR反应体系,可用于菘蓝遗传差异性分析。

关 键 词：四倍体 菘蓝 遗传差异性 ISSR—PCR 退火温度 

分 类 号：S567.239.03[农业科学—中草药栽培]