野生型斑马鱼胚胎中hoxd3基因mRNA的表达谱  

作　　者：舒莉萍[1,2] 何志旭[1,3] 姚冬静[3] 马健娟[3] 李涛[3] 叶芝旭[3] 

机构地区：[1]贵阳医学院组织工程与干细胞实验中心,贵州贵阳550004 [2]贵阳医学院免疫教研室,贵州贵阳550004 [3]贵阳医学院儿科教研室,贵州贵阳550004

出　　处：《贵阳医学院学报》2012年第5期579-579,共1页Journal of Guiyang Medical College

摘　　要：目的:为探讨hoxd3基因在斑马鱼发育过程中与血管形成可能的作用机制,用hoxd3基因的反义mRNA探针进行斑马鱼全胚胎原位杂交,观测hoxd3基因在野生型斑马鱼胚胎发育过程中的表达情况。方法:提取斑马鱼胚胎总RNA,经RT-PCR扩增斑马鱼hoxd3基因片段,将得到的hoxd3基因片段和pCS2+质粒经EcoR I、Xba I双酶切后插入pCS2+质粒中,挑选阳性克隆,通过双酶切、菌落PCR以及测序鉴定;将pCS2+-hoxd3重组子经EcoR I酶切线性化,经T3RNA体外转录体系合成地高辛标记hoxd3基因的反义mRNA探针。用hoxd3基因的反义mRNA探针进行斑马鱼全胚胎原位杂交。结果:构建和鉴定了pCS2+-hoxd3重组质粒,经斑马鱼全胚胎原位杂交检测hoxd3基因的表达,发现在Tuebingen野生型斑马鱼24 hpf-72 hpf胚胎的中脑后脑交界处以及后脑中可以观察到hoxd3基因的表达。结论:hoxd3基因在Tuebingen野生型斑马鱼胚胎发育早期的神经系统高表达,未发现在血管生成区域的表达。

关 键 词：斑马鱼 基因MRNA 全胚胎 野生型 表达谱 胚胎发育过程 d3基因 RNA探针 

分 类 号：R123.1[医药卫生—环境卫生学]