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作 者:孟松树[1] 郭鑫 张绍杰[1] 王柳[1] 仇华吉[1] 王玫[1] 童光志[1]
机构地区:[1]中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江哈尔滨150001
出 处:《中国兽医学报》2000年第2期108-111,共4页Chinese Journal of Veterinary Science
基 金:国家"8 63计划资助项目! ( 10 1-0 5 -0 3 -0 1)
摘 要:根据已发表的传染性喉气管炎病毒 ( ILTV) SA-2株的核酸序列 ,设计了 1对引物 ,以 ILTV中国王岗株 DNA为模板 ,PCR法扩增出 1条 1 .3 9kb的基因片段 ,将扩增产物插入到真核表达质粒 p CRTM 3 -Uni,得到重组质粒 p TA-g D。另将克隆到 p Bluescript SK质粒中的 g C基因酶切后 ,插入到 p CRTM 3 -Uni载体 ,得到重组质粒 p TA-g C。经电泳分析、酶切、PCR鉴定后 ,进行序列测定。序列分析表明 ,ILTV王岗株 g C基因的编码序列与 SA-2株的核苷酸同一性为 99%,而王岗株 g D基因的编码序列在其 C端多了 1 7个核苷酸 ,其余部分的同一性为 97%。鉴于 g C、g D基因在诱导机体产生对 ILTV的免疫应答中的作用 ,g C、g D基因的克隆及其真核表达质粒的构建 ,为A fragment containing gD gene of ILTV Wanggang strain was amplified by polymerase chain reaction and cloned into pCR TM 3 Uni vector and sequenced. A recombinant plasmid containing the coding sequence of gC gene ILTV of Wangggang strain was cleaved with restriction endonuclease Eco RI, and a 1 292 bp fragment of gC gene was ligated into the Eco RI site of pCR TM 3 Uni vector and sequenced.Sequence analysis indicated that gC gene of ILTV Wanggang strain displayed 99% nucleotide identities with SA 2 strain, and the gD gene of ILTV Wanggang strain was 17 bp longer than that of SA 2 strain in the C terminus,and the rest part of the gene from the two strains was almost the same.
关 键 词:GC基因 GD基因 克隆 序列分析 鸡 ILTV 基因免疫
分 类 号:S858.312.5[农业科学—临床兽医学] Q78[农业科学—兽医学]
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