石杉碱甲多克隆抗体的制备及酶联免疫检测方法的建立  

作　　者：余宇燕[1] 滕海英[1] 张红艳[1] 林舒[1] 邹艳辉[1] 

机构地区：[1]福建中医药大学药学院药学院,福建福州350108

出　　处：《时珍国医国药》2012年第10期2440-2442,共3页Lishizhen Medicine and Materia Medica Research

基　　金：福建省科技厅重点项目(No.2011Y0035)

摘　　要：目的制备珍稀药源植物蛇足石杉的活性成分石杉碱甲(huperzine A,HupA)的人工抗原及多克隆抗体,建立快速检测HupA的酶联免疫分析方法。方法采用戊二醛法,将半抗原HupA与载体牛血清白蛋白(BSA)及卵清蛋白(OVA)偶联制备人工抗原HupA-BSA和包被抗原HupA-OVA。用HupA-BSA免疫新西兰大白兔,制备抗HupA的抗血清,通过间接ELISA法和竞争ELISA法检测抗血清的效价和特异性。采用Protein A亲和层析法对抗血清进行纯化,以纯化后的多克隆抗体建立HupA的标准竞争抑制曲线。结果合成的人工抗原HupA-BSA的偶联比为10.8∶1,免疫兔子得到抗HupA的抗血清,其效价为1∶64000,HupA的标准竞争抑制曲线为Y=0.215 1X-0.095 5(R2=0.987 3)。结论成功合成石杉碱甲人工抗原,经过免疫兔子制备抗石杉碱甲的多克隆抗体,建立HupA的酶联免疫检测方法。

关 键 词：石杉碱甲 人工抗原 多克隆抗体 酶联免疫检测 

分 类 号：R283[医药卫生—中药学]