一株H5N1 NS1蛋白第101位点的甲硫氨酸决定该蛋白抗干扰素能力及亚细胞定位  

作　　者：孟晋[1] 张振锋[1] 郑振华[1] 刘艳[1] 王汉中[1] 

机构地区：[1]中国科学院武汉病毒研究所,武汉430071

出　　处：《中国科学：生命科学》2012年第10期787-794,共8页Scientia Sinica(Vitae)

基　　金：国家重点基础研究发展计划(批准号:2012CB518904)资助项目

摘　　要：A型流感病毒NS1蛋白有两种抗干扰素（IFN）机制,一种通过抑制RIG-Ⅰ信号转导完成,另一种通过与CPSF30结合,阻断细胞前体mRNA剪切和加工.目前,NS1拮抗Ⅰ型IFN生成的具体机制还不是十分清楚.本文结果显示,PR/8/34NS1蛋白部分定位于细胞质,并且表现出很强的、特异性抑制IFN-β启动子活性的能力,而H5N1NS1则明显不同.H5N1NS1主要定位细胞核,它抑制IFN的能力相对较弱,是通过抑制细胞基因整体表达水平实现的.本研究通过构建H5N1NS1的一系列突变后发现,仅将H5N1NS1的101位点的甲硫氨酸突变为PR/8/34NS1相应位点的异亮氨酸（命名为H5-M101I）即可获得了特异性抑制IFN-β启动子活性的能力,并且使该蛋白向细胞质定位,同时失去与CPSF30结合的能力.本研究还发现,之前报道的定位于138~147氨基酸位点的核输出信号（NES）并没有发挥功能.这表明,很可能存在尚未发现的其他氨基酸具有NES功能.结果表明,101位点的甲硫氨酸（Met-101）可能与其临近的第100位亮氨酸（Leu-100）共同增强了此区域的NES;除此之外,Met-101也是NS1与CPSF30结合的关键氨基酸.综上所述,本文揭示了Met-101在H5N1流感病毒生活周期中的重要性,同时为抗病毒工作提供了有价值的信息.

关 键 词：A型流感病毒 H5N1 NS1 干扰素Β CPSF30 核输出信号 

分 类 号：Q939.4[生物学—微生物学]