叶用莴苣幼苗幼叶总蛋白SDS-PAGE和Western-blot方法的优化  

Optimization of SDS-PAGE and Western-blot for Total Protein in Seedling Young Leaves of Lactuca sative L.

作　　者：李洋[1] 韩莹琰[1] 范双喜[1] 陈曙红[1] 

机构地区：[1]北京农学院植物科学技术学院,北京102206

出　　处：《中国农学通报》2012年第31期153-156,共4页Chinese Agricultural Science Bulletin

基　　金：北京市自然科学基金项目/北京市教育委员会科技计划重点项目"叶用莴苣耐热品种选育及热激蛋白变化规律研究"(KZ200710020009);北京市自然科学基金项目"热胁迫下叶用莴苣HSP家族基因协同表达机制的研究"(6112005);北京市科技新星计划项目"叶用莴苣耐热机理的研究及及耐热品种的选育"(2010B020);北京市属高等学校人才强教计划资助项目"蔬菜安全生产理论与技术学术创新团队"(PH2009071365)

摘　　要：为建立一套适合叶用莴苣(Lactuca sativeL.)热激蛋白研究的SDS-PAGE和Western-blot方法。以叶用莴苣W7为材料,采用改进的TCA/Acetone法提取叶片蛋白,比较了2种电压下SDS凝胶分离蛋白质的效果,使用4℃保存2周的抗体稀释液,并且得到了较清晰的热激蛋白70和内参蛋白Rubisco条带,初步确定了叶用莴苣叶片热激蛋白的western-blot实验条件。In order to establish a method SDS-PAGE and Western-blot suitable for heat shock protein study of Lactuca sative L.,with leaves of Lactuca sative L.（W7） as material,the author used improved TCA/Acetone method extracted leaf protein,compared protein separating effect in SDS gel in two different volt,obtained clear bands of HSP70 and rubisco using anti-body diluent stored 2 weeks at 4℃,optimized and preliminary established Western-blot experiment condition of heat shock protein of Lactuca sative L.young leaves.

关 键 词：叶用莴苣 热激蛋白 WESTERN-BLOT 

分 类 号：S636.2[农业科学—蔬菜学]