下丘脑弓状核Ghrelin对糖尿病大鼠胃运动的影响  

Ghrelin microinjected into the hypothalamic arcuatus nucleus regulates gastric motility in a diabetic rat model

作　　者：侯滕菲[1] 徐珞[1] 

机构地区：[1]青岛大学医学院病理生理教研室,山东省青岛市266021

出　　处：《世界华人消化杂志》2012年第28期2665-2671,共7页World Chinese Journal of Digestology

基　　金：国家自然科学基金资助项目;No.30470642;No.30670780;No.31071014;No.81100260;山东省科技攻关基金资助项目;No.2008GG10002006;山东省卫生厅基金资助项目;No.2007HZ026;青岛市科技局基金资助项目;No.11-2-3-3-(2)-nsh~~

摘　　要：目的:探讨下丘脑弓状核(arcuatenucleus,ARC)注射Ghrelin对糖尿病胃轻瘫(diabetic gastroparesis,DGP)大鼠胃运动的调控作用.方法:240只Wistar大鼠按数字表法随机分为10个大组(每组24只):对照组(C)、生理盐水组(NS)、Ghrelin低剂量组(L)、Ghrelin高剂量组(H)、高剂量Ghrelin合并D-Lys3-GHRP-6(DLS)组(H+D)、糖尿病胃轻瘫大鼠组(DGP)、生理盐水DGP组(DGP+NS)、Ghrelin低剂量DGP组(DGP+L)、Ghrelin高剂量DGP组(DGP+H)和高剂量Ghrelin合并D-Lys3-GHRP-6DGP组(DGP+H+D).采用腹腔注射链脲佐菌素(STZ)制作糖尿病大鼠模型;荧光免疫组织化学染色方法观察糖尿病大鼠下丘脑ARC中Ghrelin受体(GHS-R)表达变化;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和实时荧光定量PCR(real-timePCR)进一步检测GHS-RmRNA在糖尿病大鼠ARC中表达变化;采用在体胃运动记录方法,观察下丘脑ARC注射Ghrelin对糖尿病大鼠胃运动的影响.结果:在DGP大鼠ARC中GHS-R免疫阳性细胞数(10.0/mm2±2.1/mm2)和mRNA相对含量(GHS-R1a/-actin:0.48±0.13)与正常大鼠(3.0/mm2±0.7/mm2,0.21±0.10)比较均显著降低(P<0.05).正常清醒大鼠胃运动幅度为8.14g±1.58g,频率为5.18/min±0.61/min.下丘脑ARC微量注射0.05nmol和0.5nmolGhrelin,胃运动幅度呈量效依赖性增加(L:14.6g±2.2gvsNS:8.14g±1.58g,P<0.05;H:22.28g±4.10gvsNS:8.14g±1.58g,P<0.01,vsL:14.6g±2.2g,P<0.05),胃收缩频率明显加快(L:7.45/min±0.87/minvsNS:5.18/min±0.61/min,P<0.05;H:10.98/min±1.03/minvsNS:5.18/min±0.61/min,P<0.01;vsL:7.45/min±0.87/min,P<0.05).DGP大鼠胃运动幅度明显下降(2.21g±0.89gvs8.14g±1.58g,P<0.05),收缩频率明显降低(1.81/min±0.23/minvs5.18/min±0.61/min,P<0.05).下丘脑ARC微量注射0.5nmolGhrelin,DGP大鼠胃运动幅度显著增加(5.04g±1.11gvs2.14g±0.23g,P<0.05),收缩频率明显加快(3.81/min±0.43/minvs1.80/min±0.19/min,P<0.05).GHS-R阻断剂D-Lys3-GHRP-6可完全阻断Ghrelin此作用.结论:糖尿病大鼠胃运动障碍可能与下丘脑GHS-R表达减少有关;Ghrelin在ARC参�AIM： To study the effect of Ghrelin microinjected into the hypothalamic arcuatus nucleus （ARC） on gastric motility in rats with diabetic gastropa resis （DGP）. METHODS： Two hundred and forty Wistar rats were randomly divided into 10 groups： control group （C）, saline group （NS）, low-dose Ghrelin group （L）, high-dose Ghrelin group （H）, high dose Ghrelin plus D-Lys6-GHRP-6 （DLS） group （H±D）, DGP group （DGP）, saline-treated DGP group （DGP±NS）, low-dose Ghrelin-treatedDGP group （DGP±L）, high-dose Ghrelin-treated DGP group （DGP±H）, high-dose Ghrelin plus D-Lys6-GHRP-6 （DLS）-treated DGP group （DGP±H±D）. A rat diabetic model was estab lished by intraperitoneal injection of streptozoto cin （STZ）. Fluorescent immunohistochemistry, reverse transcription-polymerase chain reaction （RT-PCR） and real-time quantitative polymerase chain reaction （real-time PCR） were performed to evaluate the protein and mRNA expression of Ghrelin receptor （GHS-R） in the ARC of rats. The effect of Ghrelin injection into ARC on gas tric motility was observed.RESULTS： The number of GHS-R immunore active neurons and the relative level of GHS-R mRNA/β-actin in the ARC of normal rats were 10.0/mm2 ± 2.1/mm2 and 0.48 ± 0.13, while in DGP rats the values decreased to 3.0/mm2 ± 0.7/ rnm2 and 0.21 ± 0.10 （both P 〈 0.05）. Microinjec tion of 0.05 or 0.5 nmol Ghrelin into the ARC could increase the amplitude of gastric motility in a dose-dependent manner （L： 14.6 g ± 2.2 g vs NS： 8.14 g ± 1.58 g, P 〈 0.05; H： 22.28 g ± 4.10 g vs NS： 8.14 g ± 1.58 g, P 〈 0.01; NS： 8.14 g ± 1.58 g vs L： 14.6 g ± 2.2 g, P 〈 0.05）, and the frequency of gastric motility was also increased significantly （L： 7.45/min ± 0.87/min vs NS： 5.18/min ± 0.61/ rain, P 〈 0.05; H： 10.98/min ± 1.03/rain vs NS： 5.18/min ± 0.61/min, P 〈 0.01; H： 10.98/min ± 1.03/min vs L： 7.45/min ± 0.87/min, P 〈 0.05）. In DGP rats, gastric motility decreased with

关 键 词：下丘脑弓状核 GHRELIN 糖尿病胃轻瘫 胃 运动 

分 类 号：R587.1[医药卫生—内分泌]