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作 者:宋国庆[1] 肖兴国[1] 李绍华[2] 陈尚武 甘孟候[3]
机构地区:[1]中国农业大学农业部植物生理生化开放实验室 [2]中国农业大学园艺学院 [3]中国农业大学动物医学院,北京100094
出 处:《农业生物技术学报》2000年第2期143-146,共4页Journal of Agricultural Biotechnology
基 金:国家自然科学基金!39670519
摘 要:为探索利用转基因植物生产鸡马立克氏病疫苗的新途径,将马立克氏病病毒(Marek’sdiseasevirus,MDV)B抗原基因的两个片段(I3和K3)整合连接到相应的双元载体上,构建成带有NptⅡ和Gus基因的MDVB抗原基因的植物表达载体pArt69I3K3。利用农杆菌LBA4404介导,将构建的表达载体导入烟草,获得了经PCR扩增和Southern杂交证实的转基因植株。免疫斑点杂交显示,转MDVB抗原基因的烟草植株叶片蛋白质提取物能与MDV单克隆抗体BA4(MDVB抗原Ⅰ型单克隆抗体)、BD8(MDV抗原群共同性决定簇单克隆抗体)和鸡MDV抗血清产生阳性免疫反应,表明MDVB抗原基因在转基因烟草植株中得到初步表达。A plant expression vector pArt69I3K3 carrying chicken Marek's disease virus (MDV) B antigen gene was constructed by linking the gene to a constitutive promoter (CaM V 35S) and terminator (Ocs, 3'). Tobacco plants were transformed by using Agrobacterium tumefaciens strain LBA 4404 harboring pArt69I3K3. Marker genes NPT Ⅱ and GUS were expressed in the putative transformants. PCR and Southern blot analyses of the transformants showed that MDV B antigen gene was integrated into the genome of tobacco. Protein dot blot by using BA4 and BD8 monoclonal antibody of MDV B antigen indicated that MDV B antigen gene expressed in transgenic tobacco plants. This result suggests that there was no inherent limitation for expressing MDV B antigen gene in plants.
关 键 词:马立克氏病B抗原基因 饲料疫苗 转基因植物 鸡
分 类 号:S858.312.6[农业科学—临床兽医学]
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