结核分枝杆菌Rv3671c基因的克隆表达及免疫印迹检测  

作　　者：蒯守刚[1,2] 崔振玲[2] 黄利华[1] 刘忠华[2] 麦广良[2] 裴豪[1] 刘君[1] 何琳静 

机构地区：[1]无锡市第五人民医院检验科,江苏无锡214005 [2]同济大学医学院附属上海市肺科医院上海市结核病(肺)重点实验室,上海200433

出　　处：《临床检验杂志》2012年第11期906-908,共3页Chinese Journal of Clinical Laboratory Science

基　　金：江苏省卫生厅科研课题(YZ201005);上海市结核病(肺)重点实验室开放基金(2011K01);无锡市医管中心医学科技发展基金(YGM1027)

摘　　要：目的构建结核分枝杆菌Rv3671c蛋白的重组质粒,在大肠埃希菌中表达并纯化重组蛋白Rv3671c,并评价结核分枝杆菌Rv3671c结构域多肽的免疫学特性。方法将编码结核分枝杆菌Rv3671c蛋白的基因克隆到pET-28a载体,并在大肠埃希菌中表达,镍亲和层析和离子层析法纯化重组Rv3671c蛋白,透析复性和Lowry法测定蛋白质浓度。对蛋白质悬液进行SDS-PAGE分析并进行免疫印迹检测。结果结核分枝杆菌Rv3671c蛋白在大肠埃希菌中成功表达,层析纯化获得纯度为95.0%的重组Rv3671c蛋白,免疫印迹检测显示重组表达蛋白与结核病患者混合血清具有良好亲和性。结论 Rv3671c结构域多肽可作为新的结核病血清学检测方法的候选抗原肽组分。

关 键 词：结核分枝杆菌 结核 Rv3671c蛋白 抗原 细菌蛋白质类 

分 类 号：R378.91[医药卫生—病原生物学] Q781[医药卫生—基础医学]