MAP-H_2O_2-HRP伏安酶联免疫分析测定南方菜豆花叶病毒  

MAP-H_2O_2-HRP Voltammetric Enzyme linked Immunoassay for Trace Southern Bean Mosaic Virus

作　　者：张书圣[1] 焦奎[1] 陈洪渊[2] 王曼霞 张成良[3] 张作芳[3] 

机构地区：[1]青岛化工学院应用化学系,青岛266042 [2]南京大学化学系,南京210093 [3]农业部植物检疫实验所,北京100029

出　　处：《高等学校化学学报》2000年第8期1200-1204,共5页Chemical Journal of Chinese Universities

基　　金：国家自然科学基金! (批准号 :2 9775 0 12 );山东省青年科学基金! (批准号 :Q99B16)

摘　　要：提出间氨基酚 ( MAP) -H2 O2 -辣根过氧化物酶 ( HRP)伏安酶联免疫分析新体系 ,并用于南方菜豆花叶病毒 ( SBMV)的测定 .以线性扫描二阶导数伏安法检测 HRP催化 H2 O2 氧化 MAP的产物 ,用于游离 HRP及 SBMV的测定 ,灵敏度均高于经典的 ELISA显色光度法 .本法对 HRP测定的线性范围为 1 .0× 1 0 - 8～1 .0× 1 0 - 6 g/L,检测限为 3 .8× 1 0 - 9g/L;对 SBMV测定的线性范围为 4 .0～ 50 0 0 ng/m L,检测限为 4 .0ng/m L.用所建立的方法测定病毒感染病叶澄清液的最高稀释比为 1∶ 1 .5× 1 0 5 ,并与现行的 ELISA显色光度法进行对照 。A voltammetric enzyme linked immunoassay based on the new system of m aminophenol(MAP) H 2O 2 horseradish peroxidase(HRP) has been developed and used for the detection of HRP and southern bean mosaic virus(SBMV). HRP or labelled HRP catalyzes the oxidation reaction of MAP with H 2O 2, the product of which produces a sensitive voltammetric peak at potential of -0 46 V(vs. SCE ) in Britton Robinson(B R) buffer solution.By using this voltammetric peak, HRP can be measured with a detection limit of 3 8×10 -9 g/L and a linear range of 1 0×10 -8 —1 0×10 -6 g/L. The detection limit for the clarified SBMV is 4 0 ng/mL and the linear range of 4 0—5 000 ng/mL. The highest dilution ratio detected for the infected leaf sap is 1∶1 5×10 5.

关 键 词：南方菜豆花叶病毒 HRP 分析 免疫分析 伏安法 

分 类 号：S431.41[农业科学—农业昆虫与害虫防治] S41[农业科学—植物保护]