平果金花茶ISSR-PCR反应体系的建立与优化  

作　　者：李承卓[1,2] 史艳财[2] 邹蓉[2] 覃小玲[1,2] 黄荣韶[1] 陈宗游[2] 郭亮[3] 

机构地区：[1]广西大学农学院,广西南宁530004 [2]广西壮族自治区中国科学院广西植物研究所,广西桂林541006 [3]广西师范大学生命科学学院,广西桂林541004

出　　处：《江苏农业科学》2012年第11期17-19,20,共4页Jiangsu Agricultural Sciences

基　　金：国家自然科学基金(编号:31160137);中国科学院知识创新工程重要方向项目(编号:KSCX2-YW-Z-0913);广西科技攻关与新产品试制(编号:桂科攻11107010-1-1);国际植物园保护联盟(BGCI)项目

摘　　要：采用正交设计和单因素试验相结合的方法,快速建立并优化平果金花茶ISSR-PCR反应体系和程序。平果金花茶ISSR-PCR适宜的反应体系:20μL反应体系含模板DNA 50ng、引物0.75μmol/L、dNTP 0.15 mmol/L、Mg2+1.50 mmol/L、TaqDNA聚合酶1.00 U、10×buffer 2.00μL。扩增程序:94℃预变性5 min;94℃变性1 min,52.2℃退火45 s,72℃延伸1.5 min,45个循环;72℃延伸7 min,4℃保存。经过8份平果金花茶种质的检测,表明该体系稳定、重复性好,可用于平果金花茶遗传多样性分析。

关 键 词：平果金花茶 ISSR—PCR 正交设计 单因素试验 

分 类 号：S685.14[农业科学—观赏园艺]