猪瘟兔化弱毒株E2蛋白ABCD抗原结构域在大肠杆菌BL21(DE3)和Rosseta(DE3)中的表达及鉴定  

IDENTIFICATION OF THE ABCD ANTIGEN REGION IN E2 EXPRESSION OF HOG CHOLERA LAPINIZED VIRUS IN E.COLI BL21 (DE3) AND E.COLI ROSETTA(DE3)

作　　者：李儒曙 苏惠龙[2] 刘宇[3] 张健騑[4] 

机构地区：[1]珠海市动植物防疫监督检验中心,珠海519000 [2]珠海出入境检验检疫局,珠海519015 [3]华南农业大学兽医学院,广州510642 [4]广东省农业科学院兽医研究所、广东省兽医公共卫生公共实验室,广州510640

出　　处：《中国动物传染病学报》2012年第6期11-15,共5页Chinese Journal of Animal Infectious Diseases

基　　金：广东省自然科学基金(NO.07019474);广东省农业攻关项目(NO.2007A020300005-9)

摘　　要：为获得大量的猪瘟病毒重组蛋白抗原,本文构建了猪瘟兔化弱毒株E2蛋白ABCD抗原结构域原核重组表达质粒pET-32a(+)-ABCD,对该重组表达质粒在大肠杆菌BL21(DE3)和Rosseta(DE3)中的表达产量进行了比较分析,并采用胶体金免疫层析和蛋白质免疫印迹鉴定重组蛋白的反应原性。结果表明重组质粒pET-32a(+)-ABCD在大肠杆菌BL21(DE3)和Rosseta(DE3)中均可以获得可溶性表达,目的蛋白表达量分别占总蛋白量的比例为11.4%和19.7%,大肠杆菌Rosseta(DE3)作为表达宿主菌更高效,且重组蛋白具有反应原性。该研究为猪瘟病毒重组蛋白抗原的制备提供了参考。In order to obtain plenty of recombinant protein of classical swine fever virus,ABCD antigen region of E2 gene was amplified and used to construct pET-32a（＋）-ABCD plasmid.The plasmid was then transformed into E.coli BL21（DE3） and Rosseta（DE3）.The yields of expressed products in these two were compared as a reference to choose competent cells.The E2 protein was shown to be expressed in both E.coli BL21（DE3） and Rosseta（DE3） and accounted for 11.4% and 19.7% of the gross bacterial proteins as determined in SDS-PAGE.The recombinant E2 protein reacted with swine fever antiserum in gold immunochromatographic assay and western blotting.

关 键 词：E2蛋白ABCD抗原结构域 BL21(DE3)和Rosseta(DE3) 表达 鉴定 

分 类 号：S852.651[农业科学—基础兽医学]