登革热的抗体依赖性感染增强的体外实验研究  

Research on Antibody-dependent Enhancement of Dengue Virus Infection in vitro

作　　者：岳耀斐 潘玥[1] 杨丽娟[1] 陈俊英[1] 赵玉娇[1] 孙强明[1] 

机构地区：[1]中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所,云南省重大传染病疫苗研发重点实验室,昆明650118

出　　处：《医学研究杂志》2013年第1期37-40,共4页Journal of Medical Research

基　　金：云南省科技厅社会发展科技计划项目(2011CA016);中国医学科学院病原生物学研究所中央级公益性科研院所科研业务费项目(2009IPB102);中国医学科学院医学生物学研究所引进人才项目(IMB2009RC01)

摘　　要：目的建立异型登革热病毒(DENV)感染所产生的抗体依赖感染增强作用(ADE)的体外实验研究模型。方法将梯度稀释的抗-Ⅱ型登革热膜前蛋白prM单克隆抗体与Ⅲ型登革热病毒(MOI=3)于37℃、5%CO2培养箱内孵育90min形成抗体-病毒复合物后感染K562细胞,通过间接免疫荧光染色,real-time PCR检测DENV抗原在细胞内的表达增强。结果抗体依赖增强作用(ADE)的效果取决于抗体浓度。稀释度为1/2560的抗体与DENV结合共同感染K562后,细胞内登革热病毒抗原的免疫荧光染色结果有明显增强,real-time PCR检测的结果也进一步证实了K562细胞内登革热病毒数量显著增加。结论成功建立了登革热病毒的异型抗体依赖感染增强作用的体外研究模拟,为后续的ADE作用机制的研究提供了可靠的研究模型和实验基础。Objective To establish the research model of antibody - dependent enhancement of dengue virus infection in vitro. Methods The virus -antibody complexes were prepared by mixing anti -dengue premembrane（prM） antibodies with viruses （MOI = 3） for 90 min at 37℃ before adding to the K562 cells suspension for infection. Then the infection of dengue virus in K562 cells were detected by indirect immunofluoreseence stain and real - time PCR. Results It was found that the ADE effect was concentration - dependent. The strongest antibody -dependent enhancement （ADE） of dengue virus infection occurred when antibodies dilution were at 1/2560, but not at others. The infection of dengue virus was significantly enhanced according the results of indirect immunofluorescence stain and Real - Time PCR. Conclusion The model of antibody - dependent enhancement of dengue infection in vitro is established successfully. It will provide reliable experimental basis for the research on the mechanism of ADE of dengue virus.

关 键 词：登革热病毒 抗体依赖性的感染增强作用(ADE) K562细胞 

分 类 号：R373.33[医药卫生—病原生物学]