抗血管性血友病因子抗体在特发性血栓性血小板减少性紫癜发病机制中的作用  

The value of anti-von Willebrand factor antibody in the mechanism of idiopathic thrombotic thrombocytopenic purpura

作　　者：张敬宇[1] 刘芳[2] 马珍妮[3] 董宁征[3] 苏健[3] 赵益明[3] 沈飞[3] 汪安友[3] 阮长耿[3] 

机构地区：[1]河北医科大学第二医院血液科河北省血液病研究所,石家庄050000 [2]美国Emory大学医学院 [3]苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室

出　　处：《中华检验医学杂志》2012年第12期1118-1124,共7页Chinese Journal of Laboratory Medicine

基　　金：国家自然科学基金资助项目（30670904）

摘　　要：目的在具有正常血管性血友病因子裂解酶（ADAMTS13）活性且不存在抗ADAMTS13自身抗体的特发性血栓性血小板减少性紫癜（1vrP）患者血浆中检测是否存在抗血管性血友病因子（VwF）自身抗体，并通过体外实验验证鼠源性抗人VwF单克隆抗体（单抗）是否可以降低ADAMTS13对VwF的裂解活性。方法本研究为临床实验诊断研究。应用酶联免疫吸附试验对53例成人特发性1TrP患者检测抗VWF自身抗体，采用十二烷基硫酸钠-琼脂糖凝胶电泳进行VwF多聚体分析，检测是否存在超大分子量VwF（uL—VWF）多聚体。并且，在高剪切力和变性条件下分别观察8种鼠源性抗VwF单抗对重组ADAMTS13（rADAMTS13）裂解血浆源纯化VwF的活性的影响。结果在2例具有正常血浆ADAMTS13活性且不存在抗ADAMTS13自身抗体的特发性TrP患者血浆中检测到抗VwF自身抗体和UL—VwF多聚体。另外，一种鼠源性抗人VwF单抗SZ34在高剪切力条件下能够降低rADAMTS13对VwF的水解活性，但在静态／盐酸胍变性条件下并无此影响。结论抗VwF抗体有可能是具有正常ADAMTS13活性且不存在抗ADAMTS13自身抗体的特发性TTP患者的发病原因之一。Objective This study is aimed at determining whether anti-von Willebrand factor （VWF） autoantibodies are present in the plasma of idiopathic thrombotic thrombocytopenie purpura （3TP） patients with normal ADAMTS13 activity and undetectable anti-ADAMTS13 antibodies, and at examining whether murine monoclonal antibodies （ mAbs ） against human VWF decrease the susceptibility of VWF to ADAMTS13 in vitro. Methods Anti-VWF autoantibodies and uhralarge VWF （UL-VWF） multimers were measured in plasma samples of 53 adult patients with idiopathic TYP by enzyme-linked immunosorbent assay and sodium dodecylsulphate-agarose gel eleetrophoresis, respectively. Moreover, the effects of eight murine mAbs to different human VWF domains on VWF cleavage by ADAMTS13 were evaluated under fluid shear stress and static/denaturing conditions, respectively. Results Anti-VWF antibodies and UL-VWF muhimers were detected in two TYP patients with normal ADAMTS13 activity and undeteetable anti-ADAMTS13 antibodies. The SZ34, an anti-VWF mAb, inhibited VWF proteolysis mediated by ADAMTS13 under flow, but not static conditions. Conclusion Auti-VWF antibody may be one of the causes of idiopathic TTP with normal ADAMTS13 activity and undeteetable anti-ADAMTS13 antibodies.

关 键 词：紫癜 血小板减少性 特发性 VONWILLEBRAND因子 自身抗体 ADAM蛋白质类 

分 类 号：R554.6[医药卫生—血液循环系统疾病]