壳聚糖及聚乙烯亚胺携载 pGL3质粒转染细胞的毒性及效率实验研究  

Efficiency and toxicity of polyethylene imine and chiosan as non-viral vectors in PGL3 plasmid transfection

作　　者：曹毅[1] 刘改荣[1] 王莉[1] 陈微[1] 李园园[1] 杨晓红[1] 陶茂灿[1] 罗宏宾[1] 

机构地区：[1]浙江省中医院皮肤科,杭州310006

出　　处：《浙江医学》2012年第23期1901-1904,共4页Zhejiang Medical Journal

基　　金：浙江省科技厅面上项目基金（2009C33140）

摘　　要：目的通过对阳离子聚合物聚乙烯亚胺（PEI）以及 PEI 联合壳聚糖介导 pGL3质粒细胞内转染的效率及细胞毒性的观察,为其进一步携载目的基因转染细胞做好前期铺垫工作.方法培养 HaCaT 及 HUVEC 细胞,同时制备壳聚糖-PEI600Da （CP）以及 CP/DNA、PEI/DNA 纳米粒,采用 MTT 法观察壳聚糖、PEI600Da、PEI25kDa、CP 以及 CP/DNA、PEI/DNA 纳米粒对上述细胞的毒性作用,采用虫荧光素酶检测法观察 CP/DNA、PEI/DNA 纳米粒的转染效率.结果 CP/DNA、PEI600Da/DNA 纳米粒的细胞毒性明显低于 PEI25kDa/DNA 纳米粒的细胞毒性;CP/DNA、PEI600Da/DNA 纳米粒明显提高 DNA 转染 HaCaT、HUVEC 细胞的效率.结论 CP/DNA、PEI600Da/DNA 纳米粒有效转染 HaCaT、HUVEC 细胞,且细胞毒性低;阳离子聚合物 CP、PEI600Da 作为转染基因转染的载体具有广阔的应用前景.Objective To assess the efficiency and toxicity of polyethylene imine （PEI） and chiosan （CS） as non-viral vecors in PGL3 plasmid cel transfection. Methods Chiosan-PEI600Da （CP）, CP/DNA and PEI/DNA nanoparticles were pre-pared. The toxicity of CS, PEI600Da, PEI25Kda, CP and CP/DNA, PEI/DNA nanoparticles on the cultured HUVEC and HaCaT cel s were tested by MTT method. The transfection effiency of CP/DNA and PEI/DNA was assessed with insect enzyme fluorescent el-ement method. Results The toxicity of CP, PEI600Da, CP/DNA, PEI600Da/DNA nanoparticles on HUVEC and HaCaT cells were much lower than that of PEI25Kda and PEI25KDa/DNA nanoparticles. CP/DNA and PEI600Da/DNA nanoparticles significantly in-creased the efficiency of DNA transfection in HUVEC and HaCaT cel s. Conclusion CP/DNA and PEI600Da/DNA nanoparticles can effectively transfect PGL3 plasmid into HUVEC and HaCaT cel s with low toxicity.

关 键 词：聚乙烯亚胺 壳聚糖 质粒 HACAT HUVEC 

分 类 号：R392.32[医药卫生—免疫学]