人Bcl-w基因的克隆和原核表达  

作　　者：戴晓莉[1] 王敏[1] 杜鸿[1] 

机构地区：[1]苏州大学附属第二医院检验科,江苏苏州215004

出　　处：《江苏大学学报（医学版）》2012年第2期176-178,共3页Journal of Jiangsu University：Medicine Edition

摘　　要：目的:克隆人Bcl-w基因并原核表达Bcl-w融合蛋白。方法:提取人胃癌组织总RNA;采用RT-PCR方法扩增Bcl-w基因编码区,构建重组质粒pet28a/Bcl-w,转化大肠埃希菌ROS,测序鉴定后经增菌培养,30℃诱导6 h表达Bcl-w蛋白,免疫印迹法鉴定主要以包涵体形式存在的带有His标签的融合蛋白。结果:从人胃癌组织中扩增得到Bcl-w基因,其编码区长582 bp,编码193个氨基酸,与基因库中发表的序列同源性100%;成功构建了原核表达载体pet28a/Bcl-w,并在工程菌ROS中获得大量表达。结论:获得了人Bcl-w基因,成功制备出人Bcl-w融合蛋白,为进一步研究其生物学功能奠定了基础。

关 键 词：Bcl-w基因 基因克隆 RT-PCR 原核表达 

分 类 号：R393[医药卫生—基础医学]