鼠抗人AIF高效单克隆抗体的制备  

作　　者：戴启字[1] 邓昆[1] 王会英[1] 杨廷桐[1] 陆建福[1] 钱磊[1] 

机构地区：[1]中国人民解放军笫371中心医院检验病理科,河南新乡453000

出　　处：《中国药业》2012年第A01期13-15,共3页China Pharmaceuticals

摘　　要：目的制备抗人凋亡诱导因子（apoptosis inducing factor，AIF）单克隆抗体（McAb）并对其生物学特性进行鉴定。方法利用Ensembl数据库及抗体设计筛查软件（Dragonfly，USA）对AIF蛋白氨基酸序列进行分析，设计AIF抗原肽免疫动物，采用杂交瘤技术制备抗人AIF McAb并纯化。结果获得了3株可稳定分泌抗人AIF的杂交瘤细胞株，分泌的AIF McAb亚型鉴定重链均为IgGl，轻链为Kappa链。间接EUSA法检测结果显示，制备的抗人AIF McAb效价达到1：252400，纯化后纯度高于95％;。Western blot检测结果显示．制备的抗人AIF McAb存在与抗原带一致的Mr67kD特异条带。免疫组化检测结果显示：制备的抗人AIFMcAb可在体外结合天然的人AIF蛋白。在结肠癌组织细胞中有棕色阳性颗粒表达，说明此抗体也可用于免疫组织化学染色。结论成功制备了高活性、高纯度、高特异性抗人AIF McAb，为进一步研究AIF在肿瘤组织中的凋亡调控机制及寻找临床治疗靶点奠定了基础。

关 键 词：凋亡诱导因子 杂交瘤细胞 单克隆抗体 抗体制备 

分 类 号：R392[医药卫生—免疫学]