新型鸭病毒性肝炎病毒巢式RT-PCR检测方法的建立及应用  

Establishment and application of a nest RT-PCR method for detection of duck hepatitis virus new type

作　　者：李娇 王文秀[1,2] 祖立闯 王艳[2] 苗立中[2] 沈志强[1,2] 

机构地区：[1]山东绿都生物科技有限公司,山东滨州256600 [2]山东省滨州畜牧兽医研究院,山东滨州256600

出　　处：《中国兽医学报》2013年第3期341-344,351,共5页Chinese Journal of Veterinary Science

基　　金：山东省优秀中青年科学家科研奖励基金资助项目(BS2011SW026)

摘　　要：根据GenBank上登录的新型鸭病毒性肝炎病毒(N-DHV)基因组序列,设计合成内外2对引物,优化PCR反应条件,建立了检测新型鸭肝炎病毒的巢式RT-PCR方法。结果显示,该方法对Ⅰ型鸭病毒性肝炎病毒(DHV-Ⅰ)、新城疫病毒(ND)、传染性法氏囊病毒(IBDV)、鸭病毒性肠炎病毒(DEV)、鸭细小病毒(DPV)的扩增结果均为阴性;该方法第1次扩增的敏感性是10pg,第2次扩增的敏感性是0.1pg,第2次比第1次扩增的敏感性高100倍。结果表明,建立的巢式RT-PCR方法具有特异性强、敏感性高、重复性好等优点,可以准确快速检测出极低含量的N-DHV,解决了新型鸭肝炎病毒不易在组织病料中检出困难的难题,为新型鸭病毒性肝炎的快速诊断、净化及深入研究奠定了基础。Based on N-DHV gene sequence in primers,established a nested PCR for N-DH duck hepatitis virus type I （DHV- I ）,New GenBank, synthesized outer V detection. The method wa castle disease virus （IBDV） ,duck enteritis virus （DEV）, duck parvoviru neg 0.1 and and inner s used for infection b the PCR ative;the method sensitivity first amplification is 10 pg,the second amp pg,100 times higher than the first amplification. This method had good reproducibility,could be used for rapid diagnosis of N-DHV disease. lification two pairs of detection of ursal disease results were sensitivity is specificity, sensitivity

关 键 词：新型鸭病毒性肝炎病毒 巢式RT-PCR 检测 

分 类 号：S852.65[农业科学—基础兽医学]