SAMHD1蛋白单克隆抗体的制备及SAMHD1在不同细胞中的表达鉴定  

Preparation of the monoclonal antibody against SAMHD1 and expression identification of SAMHD1 in different cells

作　　者：戈曼[1,2] 吴星亮[2] 尹鑫[1,2] 魏萍 王晓钧[2] 

机构地区：[1]东北农业大学动物医学学院,黑龙江哈尔滨150030 [2]中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/大动物病研究室,黑龙江哈尔滨150001

出　　处：《中国预防兽医学报》2013年第3期242-244,共3页Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine

基　　金：国家自然科学基金面上项目(31072113);兽医生物技术国家重点实验室基金项目(SKLVBP2012)

摘　　要：SAMHD1是最近发现的在人髓系细胞中发挥抗艾滋病毒作用的一种天然蛋白。为制备抗人huSAMHD1蛋白的单克隆抗体(MAb),本研究利用原核表达并纯化的人huSAMHD1重组蛋白为免疫原,经腹腔免疫4周龄BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,经间接ELISA法筛选和4次有限稀释法克隆纯化,获得了1株稳定分泌MAb的杂交瘤细胞株。Western blot与间接免疫荧光试验结果表明,获得的MAb与人huSAMHD1的真核表达蛋白呈阳性反应,而与猴、马SAMHD1的真核表达蛋白呈阴性反应,表明其具有很好的特异性,可以用于ELISA、免疫荧光和免疫印迹检测以及对huSAMHD1的进一步研究。SAMHD1 is newly identified as an anti-H1V-1 factor in human myeloid cells. To prepare monoclonal antibody （MAb） against SAMHD1, the myeloma cell SP2/0 fused with the spleen cells of BALB/c mice which were immunized with the purified human SAMHD1 expressed in E.coli. One hybridoma was identified positively using indirect ELISA. The western blot and indirect immunofluorescence assay demonstrated that the MAb was able to react positively with human SAMHD1 protein, whereas no cross reaction with macaco and equine SAMHD1, indicating the MAb could be further used in the SAMHD1 study.

关 键 词：SAMHD1 单克隆抗体 ELISA 免疫荧光 免疫印迹 

分 类 号：S852.4[农业科学—基础兽医学]